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烟草突变体筛选与鉴定方法篇:6.烟草T-DNA激活标签突变体侧翼序列筛选与鉴定
烟草 突变体筛选 鉴定方法篇
2015/8/27
通过激活标签技术(activation tagging)得到突变群体是构建突变体库的一种重要方法,应用此种方法研究基因功能,不管是用正向或反向遗传学方法,都必须先获得插入位点的侧翼序列(flanking sequence)。随着拟南芥、水稻及烟草等作物的侧翼序列数据库的不断完善及烟草全基因组测序的完成,越来越体现出激活标签技术对于推动烟草功能基因组学研究具有巨大的潜力。
2015年2月11日，国家知识产权局公开一件由中国农业科学院烟草研究所申请的发明专利：一种提取基因组DNA的提取液、其应用及利用该提取液快速高效提取烟草基因组DNA的方法。
中国构建首个烟草T-DNA激活标签插入突变体库（图）
中国 首个烟草T-DNA激活标签 突变体库
2014/12/9
在国家烟草专卖局烟草基因组计划重大专项经费的资助下，通过4年的协同攻关，中国农业科学院烟草研究所和生物技术研究所构建了首个烟草T-DNA激活标签插入突变体库。相关研究成果已在线发表于国际重要植物学期刊《植物学（Planta）》。与此同时，烟草所还配套完善了烟草突变体信息检索数据库和突变资源长期保存库，为我国烟草功能基因组学研究奠定了良好的技术和材料基础。
在国家烟草专卖局烟草基因组计划重大专项经费的资助下，通过4年的协同攻关，中国农业科学院烟草研究所和生物技术研究所构建了烟草T-DNA激活标签插入突变体库。相关研究成果已在线发表于国际重要植物学期刊《植物学（Planta）》。与此同时，烟草所还配套完善了烟草突变体信息检索数据库和突变资源长期保存库，为我国烟草功能基因组学研究奠定了良好的技术和材料基础。
DNA烷基化损伤研究进展
烷基化损伤 烷化DNA加合物 NNK
2014/3/21
DNA的烷基化损伤可导致复制过程中的错配，被认为是引起基因突变及相关疾病的原因。烷基化DNA加合物是重要的DNA烷基化损伤产物。本文介绍了DNA烷基化损伤的修复机制，以及产物。综述了烷化类损伤试剂，及其作用于细胞产生烷基化加合物的机理。讨论了烷化类DNA加合物与吸烟之间的关系。综述了烷化类DNA加合物的检测方法，展望了烷基化DNA加合物的研究方向及作为烷基化损伤标志物的研究前景。
烟草T-DNA激活标签插入突变体库的创制过程中，需要进行大量的T-DNA插入位点的侧翼序列扩增，因此选择一种适用于烟草T-DNA侧翼序列扩增的高效方法尤为必要。本研究比较了TAIL-PCR、PCR-walking、FPNI-PCR三种方法对T-DNA插入位点侧翼序列的扩增效率、插入位点确定的比例和同源蛋白比对结果，并对3种方法的PCR程序、体系和引物设计等方面进行了优化，确定TAIL-PCR更适合...
烤烟烟叶DNA甲基化与气象因子的关系分析
烤烟 DNA甲基化 气象因子 灰色关联分析 修正的logistic模型
2012/3/19
为深入研究特色烟叶的形成与气象因子的关系，用灰色关联理论结合生产实际选出与烟叶DNA甲基化相关的平均最高温度、总日照时数、平均相对湿度和总降雨量等4个气象因子，并建立了DNA甲基化（因变量）与4个气象因子（自变量）之间修正的Logistic模型。单因子效应分析表明，平均最高温度、总日照时数和平均相对湿度与DNA甲基化水平呈正相关关系，对烟叶DNA甲基化影响的程度依次为，平均最高温度＞平均相对湿度＞...
烟草花粉管通道导入外源DNA技术
烟草 花粉管 通道
2009/7/6
花粉管通道技术（pollen tube pathway）是Zhou【1】等人提出DNA片段杂交理论之后设计的自花授粉后外源DNA导入植物的转基因技术。花粉管通道技术，又称授粉后外源基因导入植物技术，是指利用植物授粉后所形成的天然花粉管通道(花粉引导组织)经珠心通道将外源DNA携带进入胚囊，转化受精卵或其前后的生殖细胞(精子、卵子)，由于它们仍处于未形成细胞壁的类似“原生质体”状态，并且正在进行活...
烟草黑胫病发生动态与黑胫病菌全基因组(DNA)遗传分化关系的研究
烟草黑胫病菌 指纹图谱 遗传聚类组 病情发生动态
2008/7/14
近年在我国罗汉果主产区严重发生罗汉果芽枯病。通过植物寄生生物学、土壤学及植物营养学分析 ,证明该病为缺硼所致的生理性病害。土壤酸化是导致其有效硼含量减少的重要原因。大田试验结果表明 ,深施硼砂加石灰对控制该病发生、促进罗汉果植株生长、提高植株含硼量及其产量具有很好的效果。
为了研究侵染云南烟草的粉虱传双生病毒的种类及其伴随的致病性卫星分子DNAβ的遗传多样性，从云南各地区表现为曲叶、曲叶耳突的烟草上获得病毒分离物Baoshan1，Baoshan2，Baoshan3，Baoshan4，Dali，Lijiang，Yuanmou1和Yuanmou2。通过双生病毒DNA–A基因间隔区和部分外壳蛋白基因的引物及其卫星分子DNAβ设计的引物分别进行PCR扩增。序列分析发现Bao...
采用花粉管通道法，将毛曼陀罗（Datura innoxia Mil1）的总DNA导入烟草栽培品种Basma，经过田间筛选，得到属间杂交品系TD801；TD801的农艺性状、常规化学成分与受体亲本Basma具有一定差异，GC-MS检测表明，TD801含有供体毛曼陀罗中特有的药用成分：阿托品和东莨菪碱。选用75个随机引物分别对TD801、毛曼陀罗、Basma进行RAPD扩增，在TD801中共扩出454...
烟草DNA的提取与SRAP反应体系的建立
2007/12/25
以10个烟草栽培品种为试验材料，研究了烟草DNA的提取方法以及对建立烟草SRAP-PCR反应体系的影响因子设置梯度实验，筛选和建立可扩增多态性高、重复性好、带型清晰的最佳SRAP-PCR反应条件：在25μL的反应体系中，MgCL22.0mmol、dNTP200μmol，上下引物各30ng、DNA模板40ng、DNA聚合酶1.5U，扩增程序为：在94℃预变性5min，反应前5个循环在94℃1min，...
烤烟叶数株高突变株的生长特征及DNA初步鉴定
2007/12/25
把2001年烤烟大田自然条件下出现的多叶数、超株高的突变株，采用组织培养获得的再生苗，2002年在3个不同生态地点栽植进行生长观察，同时从细胞学、生理生化和遗传物质DNA的鉴定方面，以原品种株做对照。结果发现，在植株形态生长方面，突变株较对照株叶数仍表现出多叶数、超株高和晚花发育的特征性状；在叶细胞结构方面，突变株叶片气孔保卫细胸叶绿体个数极显著多于对照株；在生理生化特性指标方面，突变株叶绿素a、...