搜索结果: 1-10 共查到“作物遗传学 RNAi”相关记录10条 . 查询时间(0.114 秒)
蓖麻细胞色素P450基因片段的克隆及RNAi表达载体的构建
蓖麻 P450 RNAi 载体构建
2013/9/5
采用PCR方法克隆了蓖麻细胞色素P450基因的正反2个片段。正向片段长为525个碱基,反向片段长为421个碱基。经测序分析,得到的正向基因片段和反向基因片段与GenBank 上的蓖麻细胞色素P450基因(XM_002525863.1)的碱基同源性分别为98.85%和99.51%。利用载体pHANNIBAL和限制性内切酶将正反2个片段连接成具有发夹结构的中间载体pHAN-P450S-P450A,然后...
RNAi机制可以通过dsRNA诱导同源mRNA的降解，从而导致该基因转录后沉默。RNA干扰作用从发现以来就具有了利用转录后基因沉默（PTGS）来进行抗虫的一种潜在可能性。针对dsRNA的这种作用，研究中提取蚜虫RNA，克隆出蚜虫Cathepsin B基因的干扰片段并构建出RNAi载体，转入本氏烟草中，在转基因烟草体内表达dsRNA。成功构建RNAi载体后，通过农杆菌转化和叶盘法将RNAi载体导入烟...
白菜转脂蛋白-CaMBP10基因RNAi沉默体系的初步建立
遗传转化 脂蛋白-CaMBP10基因 初步建立
2011/8/24
为了研究白菜转脂蛋白-CaMBP10的体内功能，构建含有该基因片段的RNAi质粒，以农杆菌介导法对大白菜‘津育60’进行遗传转化，通过对转基因植物在生物与非生物胁迫中表型变化的研究，确定其体内功能。本文报告RNAi质粒的构建、鉴定及其转化植株基因组DNA中外源片段的鉴定。DNA分析结果显示外源基因已成功插入了白菜基因组，RT-PCR检测结果显示转化植株内源CaMBP10基因的表达明显降低，为后续的...
可溶性淀粉合成酶Ⅱ（SSⅡ）是小麦籽粒支链淀粉合成的主要角色，但是其三个部分同源基因（SSⅡ-A、SSⅡ-B和SSⅡ-D）对支链淀粉合成的贡献大小目前还未见报道，探究它们对支链淀粉合成的作用，对小麦淀粉合成的遗传操纵和淀粉品质改良具有重要意义。此文通过RT-PCR方法克隆了小麦SSⅡ-A基因cDNA的部分序列（长度为539 bp），经序列比对发现，它与AB201445.1（Triticum aes...
紫花苜蓿锌指蛋白基因RNAi表达载体的构建及在苜蓿的转化
紫花苜蓿 锌指蛋白 RNAi 转基因
2010/3/2
根据紫花苜蓿锌指蛋白MsZFN基因(GenBank登录号为EU624138)序列，设计两对含有酶切位点的特异性引物，以紫花苜蓿cDNA为模板，分别合成用于构建干扰载体的正反义片段，将正反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置，构建成含有发夹结构的RNAi载体pART-F-R。利用农杆菌介导方法，将pART-F-R转化到紫花苜蓿中，经过PCR检测，获得了3株转基因植株。经过RT-PCR检测，证...
采用一种新型RNAi载体培育转基因高直链淀粉马铃薯
RNAi nos终止子 反向重复序列 高直链淀粉马铃薯
2009/11/3
采用PCR技术分别克隆nos终止子、烟草axi1内含子和烟草ubi.u4启动子，亚克隆部分与马铃薯Sbe1同源、部分与Sbe2同源的融合基因SIII，构建具有“ubi.u4启动子—反向SIII—反向nos终止子—axi1内含子—正向nos终止子”结构的异源3¢端UTR反向重复序列型RNAi载体pCUSNI，采用农杆菌介导法转化马铃薯品种陇薯3号、甘农薯2号和大西洋，获得了16个转基因植株...
【目的】阐明油菜基因BnWRI1对其种子含油量的影响。【方法】采用RT-PCR技术从油菜中克隆到BnWRI1基因编码区内384 bp的片段，将该片段正反向插入干扰载体pGΩ4ARi中，构建成RNAi表达载体pGΩ4ARi-WRI1，通过花粉管通道法将其转入油菜受体品种中双9号中，【结果】获得3棵转基因植株，PCR扩增和基因组Southern杂交证实外源片段已整合在受体油菜基因组中。利用半定量RT-...
农杆菌介导的双SBE基因RNAi载体对水稻的遗传转化
水稻 淀粉分支酶 转基因 RNA干涉
2009/6/5
[ 目的] 提高水稻中直链淀粉的含量, 扩大稻米的利用范围。[ 方法] 以水稻中花11 品种为材料, 通过农杆菌介导法, 侵染水稻幼胚
诱导出的愈伤组织, 将淀粉分支酶基因SBE1 和SBE3 同时导入受体愈伤组织, 经过一系列的共培养、预分化、分化、生根壮苗后, 获得含
有转基因的转化植株, 并对转化植株进行PCR 鉴定。[ 结果] 通过用根癌农杆菌介导法, 侵染由水稻幼胚诱导的274 粒...
浅析RNAi技术的应用及发展前景
RNAi技术 基因治疗 基因功能 生物品种改良
2009/5/19
RNA 干涉( RNAinterference , RNAi) 作为研究基因治疗、基因功能、生物品种改良等方面的一种有效方法已经被研究者广泛接受。
作为基因抑制的一种有力工具, 与其他的方法相比,RNAi 的操作过程更简单, 成功率更高。通过RNAi 可以实现对特定的mRNA 的选择
性降解, 进而抑制其翻译过程。对RNAi 技术的应用及发展前景进行了探讨。