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鸡胚发育中免疫器官肥大细胞类胰蛋白酶的研究
鸡胚发育 免疫器官 肥大细胞类胰蛋白酶
2013/9/16
研究不同日龄鸡胚免疫器官中肥大细胞（MC）与类胰蛋白酶阳性细胞（TPC）的形态、 分布及出现时间。方法 取不同日龄鸡胚胸腺、脾脏和法氏囊, 用Carnoy’s液固定, 阿尔新蓝-藏红O复染（AB/SO）法与免疫组织化学SABC法观察MC和TPC的分布。结果 13~14日龄鸡胚的胸腺、法氏囊、脾脏中最早出现MC。随着日龄的增加, MC数量逐渐增多。16日龄鸡胚胸腺、脾脏和法氏囊组织中最早观察到TPC...
群体水平日本血吸虫弹性蛋白酶遗传差异研究
日本血吸虫 弹性蛋白酶 遗传多态性 自然选择
2013/11/11
分析不同地理来源的日本血吸虫群体弹性蛋白酶基因的遗传差异，研究该基因是否受到自然选择。 方法 PCR扩增不同流行区的血吸虫成虫弹性蛋白酶基因并测序，分别计算血吸虫各群体遗传多态性指数（Watterson’s θ和 Tajima’s π）、选择压力指数（dN/dS和Tajima’s D）以及群体间分化指数（Fst），用Network软件进行系统进化分析。 结果 共获得73条来自不同群体的日本...
小RNA干扰蛋白酶体亚基α7抑制K562细胞增殖
蛋白酶体亚基α7 细胞周期蛋白 细胞增殖
2014/2/18
运用小干扰RNA（siRNA）技术降低人髓性白血病细胞株K562细胞20S蛋白酶体亚基α7（PSMA7）基因的表达水平，探讨PSMA7表达下调对其细胞功能的影响。方法 采用HiPerFect将化学合成的针对人PSMA7基因的特异性siRNA转染入K562细胞后，用Western blot法检测siRNA对PSMA7蛋白表达的抑制效果，采用MTS法及细胞计数法检测细胞增殖速率，流式细胞术检测细胞周期...
简单异尖线虫D-天冬氨酸蛋白酶基因的克隆和表达
简单异尖线虫 D-天冬氨酸蛋白酶 克隆 原核表达
2012/10/15
克隆简单异尖线虫Ⅲ期幼虫（L3）的D-天冬氨酸蛋白酶基因（AsAP）全长，研究其表达蛋白的特性。 方法 根据GenBank中简单异尖线虫D-天冬氨酸蛋白酶基因表达序列标签的部分信息，设计特异引物并用cDNA末端快速扩增技术得到AsAP全长序列，分析推导的蛋白序列特征，并预测其三级结构。用RT-PCR扩增简单异尖线虫L3的AsAP基因编码序列，产物用EcoRⅠ和SalⅠ双酶切，连入表达载体pET3...
通过研究结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸(ASODN)对人胰腺癌细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)表达及细胞增殖与侵袭力的影响，深入探讨CTGF在胰腺癌发生、发展中的作用机制，为CTGF ASODN在胰腺癌基因治疗中的运用奠定理论基础。方法 经脂质体介导将CTGF ASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990，荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率;逆转录-聚合酶链...
五没食子酰基葡萄糖对卵巢癌HO-8910细胞凋亡调控基因表达与胱天蛋白酶凋亡途径的影响
五没食子酰基葡萄糖 卵巢癌HO-8910细胞 细胞凋亡 Bcl-2家族 凋亡抑制因子 胱天蛋白酶
2013/10/29
探讨五没食子酰基葡萄糖(PGG)诱导卵巢癌HO-8910细胞凋亡的作用及诱导胱天蛋白酶凋亡途径的机制。方法 PGG 10,20,40和80 μmol·L-1处理HO-8910细胞48,72和96 h后,MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33258染色观察HO-8910细胞核形态改变,AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;Western 印迹法检测细胞内胱天蛋白酶酶原及...
东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry的表达和酶活分析
东亚三角涡虫 胰蛋白酶 蛋白表达 酶活
2013/7/23
通过对东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry氨基酸序列比对分析, 发现保守的催化三联体结构中第一位的His被Lys所取代。为了探究这种突变是否会对胰蛋白酶的活性有影响, 文章构建了原核表达重组质粒pET-28a- Djtry, 转化到E.coli BL21中, 利用IPTG诱导表达, 对表达的重组蛋白进行变性、复性、纯化以及Western blotting鉴定, 获得成分均一的活性蛋白。利用牛胰蛋白酶为标...
寄生性线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂研究进展
寄生性线虫 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 免疫调节
2012/5/3
半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cysteine protease inhibitor，CPI或cystatin)是半胱氨酸蛋白酶可逆性紧密结合的天然抑制剂。寄生性线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂不仅具有独特的半胱氨酸蛋白酶抑制活性，而且还可以调节宿主免疫反应，在寄生虫逃避宿主免疫应答，适应寄生生活中起着重要作用。本文综述了半胱氨酸蛋白酶抑制剂的基本类型、结构特征和作用机制，以及寄生性线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的研究...
对艾滋病毒蛋白酶异位抑制剂体系和活性位抑制剂体系进行8 ns的分子动力学模拟，用MM-PBSA方法分别计算了抑制剂与蛋白酶的结合自由能。异位抑制剂体系中抑制剂与蛋白酶的结合自由能为-90.30 kcal/mol，活性位抑制剂体系中为-59.58 kcal/mol。在异位抑制剂体系中分子片段4DX卡在蛋白酶的exo位，使蛋白酶活性位点附近残基的活动范围减小，有利于抑制剂被束缚在活性位点附近。异位抑制...
探讨宫颈鳞状细胞癌中磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK)1/2和基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达与临床病理关系。方法 采用免疫组织化学方法检测P-ERK1/2和MMP-9在30例慢性宫颈炎、45例宫颈上皮内瘤变(CIN)和58例宫颈鳞癌患者组织中的定性表达情况。结果 P-ERK1/2和MMP-9在慢性宫颈炎、CIN及宫颈鳞癌组织中的阳性率分别为0和0、28.9%和24.4%及77.6%和65....
杞菊地黄汤对视网膜变性大鼠半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3表达的影响
杞菊地黄汤 视网膜变性 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 凋亡
2012/6/11
观察杞菊地黄汤对实验性视网膜变性大鼠的治疗机制。 方法: 将生后45 d的SD大鼠分为正常组、模型对照组和杞菊地黄汤组,正常组不做处理,生后47 d中药组大鼠灌服杞菊地黄汤8.3 g·kg-1(15 mL·kg-1),模型对照组同时灌服等体积生理盐水,生后50 d ip N-甲基-N-亚硝脲(N-methyl-N-nitrosourea, MNU)40 mg·kg-1造成视网膜变性模型,正常组第5...
研究系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的表达，分析MMP-3、TIMP-1与各临床指标及不同肾脏病理类型之间的关系。方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)对60例SLE患者及30例健康人血清中MMP-3及TIMP-1的水平同时检测后进行分析。结果 SLE患者血清MMP-3、TIMP-1水平均较正常人降低，MMP-3/TIMP...
研究贝那普利对糖尿病大鼠心肌基质重塑的作用机制。方法 SD大鼠ip注射链脲佐菌素制备糖尿病模型。治疗组ig给予BZ 10 mg·kg-1，连续12周。光镜及电镜下观察左心室心肌组织改变，测定心脏质量指数；Western印迹法测定左心室心肌组织胶原Ⅰ型及Ⅲ型含量，基质金属蛋白酶2（MMP-2），金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP-2 ）表达及转化生子因子β1（TGF-β1）和结缔组织生长因子（CTG...
免疫蛋白酶体亚基在干燥综合征唇腺中的表达
干燥综合征 蛋白酶体 涎腺
2012/5/9
观察免疫蛋白酶体亚基人低分子质量多肽(LMP) 2、LMP7在干燥综合征(pSS)患者唇腺中的表达情况, 探讨其在pSS诊断、鉴别诊断和发病机制中的作用。方法 收集40例pSS患者、15例非pSS的结缔组织病患者和9例正常人的下唇唇腺组织标本，通过免疫组织化学方法, 观察LMP2和LMP7在3组唇腺组织中的表达情况; 计算腺泡阳性率，半定量分析LMP2和LMP7在各组唇腺组织中的表达强度。对数据进...