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观察人参皂苷Rb1对Aβ25-35诱导的海马神经元tau蛋白过度磷酸化的影响，并探讨其对周期依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinase 5，CDK5)及激动亚基p25/p35的可能作用。通过蛋白免疫印迹法和免疫细胞化学染色法检测胎鼠海马神经元tau蛋白在Thr205、Ser396和Ser404位点的磷酸化水平，及CDK5的两个亚基cdk5和p25/p35的蛋白水平。20 μmo...
人参皂苷Rb1通过JNK/p38 MAPK途径减轻Aβ25-35诱导的胎鼠皮层神经元tau蛋白过度磷酸化
人参皂苷Rb1 β淀粉样蛋白25-35 tau蛋白 磷酸化 JNK/p38 MAPK
2009/11/20
探讨在Aβ25-35(beta-amyloid peptide (25-35)，Aβ25-35)诱导的拟阿尔茨海默病样胎鼠皮层神经元tau蛋白过度磷酸化中，人参皂苷Rb1对tau蛋白磷酸化及JNK/p38 MAPK的可能作用。应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学染色的方法，观察tau蛋白磷酸化和JNK(c-jun N-terminal kinase)/p38 MAPK的表达情况。凝聚态Aβ25-35(2...
GSH减少可加强MNNG对P38 MAPK磷酸化
P38MAP激酶 谷胱甘肽 N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍
2009/10/28
目的：了解低浓度N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）对P38MAPK的影响, 以及谷胱甘肽（GSH）在该信号通路中的调节作用。 方法： 用L-丁硫氨酸-S,R-磺基(L-buthionine-S,R-sulfoximine) 减少细胞谷胱甘肽含量后，采用Western印迹法比较MNNG处理组和对照组P38MAPK磷酸化状态, 观察MNNG对P38磷酸化状态的影响。用光密度扫描仪测定各蛋白...
目的： 探讨15-羟化二十烷四烯酸（15-HETE）对肺动脉内皮细胞（pulmanory artery endothelial cells, PAECs）一氧化氮合酶（endothelia nitric oxide synthase, eNOS）活性的影响。 方法： 通过测定大鼠离体肺动脉环张力，比较去血管内皮、eNOS抑制剂L-NAME对15-HETE收缩肺动脉的影响；通过免疫沉淀和免疫印迹方...
目的：构建高表达糖原合成激酶3β（GSK3β）的SH-SY5Y（人骨髓神经母细胞瘤细胞）转基因细胞模型，观察GSK3β高表达对宿主细胞tau蛋白磷酸化、微管稳定性的影响。 方法：构建GSK3β真核表达质粒，转染SH-SY5Y细胞，使GSK3β在SH-SY5Y细胞中得到高表达，应用蛋白免疫印迹方法，观察tau蛋白磷酸化、总tau蛋白、微管蛋白乙酰化水平的变化情况。 结果：GSK3β真核表达质粒转染S...
格尔德霉素对肝癌细胞Akt磷酸化及细胞周期的影响
格尔德霉素 肝癌细胞 Akt磷酸化 细胞周期
2009/7/28
目的: 研究热休克蛋白90抑制剂格尔德霉素(geldanamycin，GA)对肝癌细胞生长的影响并探讨相关机制.方法: 用MTT法检测药物对肝癌HepG2细胞的生长抑制作用，并用流式细胞术分析细胞周期与凋亡状况.Western印记杂交法检测细胞内蛋白激酶B/AKT磷酸化状态的变化.结果: 400 mumoL/L浓度的GA处理细胞后，HepG2细胞胞内磷酸化AKT的水平明显下降(24 h为对照组66...
目的:研究丙型肝炎病毒非结构区3(HCV NS3)蛋白对正常人源肝细胞的转化及MAPK磷酸化调节的作用.方法:利用脂质体介导转染技术和G418筛选得到稳定表达NS3蛋白的正常人源性肝细胞QSG7701,PCR和免疫组化S-P法检测细胞中NS3的表达;细胞记数和软琼脂实验鉴定其生物学性质；抗磷酸化MAPK抗体和抗MAPK抗体Western blot 检测转染细胞MAPK活性及表达.结果:HCV NS...
阿魏酸钠对血管平滑肌细胞热休克蛋白27磷酸化的影响
阿魏属 热休克蛋白质27 血管紧张素II 血小板源性生长因子
2009/6/11
目的： 研究阿魏酸钠对血管紧张素II（angiotensinⅡ,AngII）与血小板源性生长因子-BB（platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB）诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）中热休克蛋白27（heat shock protein 27,HSP27）磷酸化的影响。方法：采用体外培养大鼠胸主动脉平...
虎杖苷抗肺缺血再灌注损伤作用及对磷酸化蛋白激酶Cα调节的实验研究
虎杖苷 肺 再灌注损伤 蛋白激酶Cα
2009/6/3
目的：探讨虎杖苷（PD）抗肺缺血再灌注损伤作用及对磷酸化蛋白激酶Cα（PKCα）活性调节。方法:采用在体单肺原位缺血再灌注损伤模型。健康日本大耳白兔40只随机均分成假手术对照组（sham组）、肺缺血再灌注组(I/R组)、肺缺血再灌注+虎杖苷组（PD组）、肺缺血再灌注+PD+多粘菌素B组（PMB组）。各组在不同时点抽血检测丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性。实验末，测湿干重比（W/D...
上海交通大学生物化学课件第四章 三酸酸循环和氧化磷酸化。
磷酸化蛋白质组学方法在信号网络解析中的应用
磷酸化蛋白质组学 信号转导 网络
2009/4/22
信号转导是细胞对各种外界刺激的应答反应，蛋白磷酸化或去磷酸化是信号从胞外流向胞内并导致细胞效应过程中的关键机制。磷酸化蛋白质组学(phosphoproteomics)是采用蛋白质组学的分析方法，研究细胞中所有磷酸化蛋白质及其修饰过程，从整体上观察细胞中被修饰的磷酸化蛋白质的状态及其变化，进而分析特定磷酸化修饰对生命过程的调控作用及其分子机制。
CagA对AGS细胞Ca2+相关蛋白磷酸化的影响
CagA AGS细胞 Ca2+ 相关蛋白磷酸化
2009/2/9
目的: 分析幽门螺杆菌(H pylori)细胞毒素相关蛋白A(CagA)对人胃腺癌黏膜上皮细胞(AGS)Ca2+相关蛋白磷酸化的影响, 进一步揭示H pylori的致病机制. 方法: 采用金属离子亲和吸附富集技术富集H pylori、H pylori CagA缺失株(H pylori △CagA)与AGS细胞相互作用4 h, 以及培养相同时间的AGS细胞的磷酸化蛋白, 利用二维凝胶电泳技术分离磷酸...
目的：观察8Hz 90dB次声作用对大鼠海马PKA表达及CREB磷酸化水平的影响。方法：采用免疫组织化学方法，观察8Hz 90dB次声作用不同时间点大鼠海马PKA表达及p-CREB-1（Ser-133）磷酸化水平。结果：8Hz 90dB次声作用后，大鼠海马CA1区各时间点PKA表达均上调，相应时间点CREB磷酸化水平亦上调，两者之间的变化呈显著正相关。CA3区除7d组PKA表达上调、CREB磷酸...
三七总皂甙对吗啡戒断大鼠海马磷酸化CREB蛋白表达及CREB/DNA结合活性的影响。