搜索结果: 1-15 共查到“农学 质粒”相关记录75条 . 查询时间(0.086 秒)
为探究嗜水气单胞菌中内生质粒与菌株对喹诺酮类抗生素耐药表型的关系，本实验克隆并分析了分离自湖北仙桃某渔场患病团头鲂、对喹诺酮类抗生素耐药的嗜水气单胞菌W39菌株中的质粒pAhW39。测序结果显示，质粒pAhW39的大小为6 739 bp，GC含量为46.13%，低于目前已公布的嗜水气单胞菌染色体DNA的GC含量(60.1%~62.0%)，表明该质粒可能是通过水平转移而获得；含有4个预测的开放阅读框...
本研究计划构建能同时表达牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）优势抗原基因的重组质粒并研究其免疫效果，旨在为BVD-IBR二联核酸疫苗的研制提供参考。采用PCR扩增目的基因E0及gD并将其依次连接至真核表达载体pVAX1-IRES中，构建pVAX1-E0-IRES-gD重组真核表达载体；将pVAX1-E0-IRES-gD转染至293T细胞中，间接免疫荧光法检测目的基因在细胞...
利用化感物质开发除草剂是目前新型除草剂发展的一个重要方向。高粱素是高粱中分泌的一种化感物质，可对多种杂草的生长表现出显著的抑制作用。高粱烷基间苯二酚合酶（alkylresorcinol synthase，Sb_ARS）是高粱素生物合成的关键酶。当以大肠杆菌Escherichia coli作为宿主进行Sb_ARS的胞内表达时，细胞破碎是其中最为费时且最昂贵的步骤之一。本研究通过构建新型双控表达质粒p...
表达柔嫩艾美耳球虫HMGB1基因质粒DNA的免疫效果分析
高迁移率组蛋白 真核表达 免疫保护
2016/2/24
旨在评价表达柔嫩艾美耳球虫（E.tenella）HMGB1基因质粒DNA免疫对同源株攻虫的免疫保护效果。将EtHMGB1基因插入pcDNA3.1(-)/myc-His A真核表达载体中，并在Hela细胞中进行体外瞬时表达。设计了pcDNA3.1(-)/myc-EtHMGB1免疫组、pcDNA3.1(-)/myc-His A免疫组、重组蛋白质+FCA佐剂免疫组、pcDNA3.1(-)/myc-EtH...
为分析携带blaCTX-M-65、rmtB和fosA3多重耐药质粒pHN7A8的适应性代价，将犬源大肠杆菌7A8的多重耐药质粒pHN7A8转化入大肠杆菌JM109中，获得转化子7A8JT，并采用生长曲线测定和竞争试验方法研究pHN7A8对宿主菌适应性的影响。结果表明，携带pHN7A8的转化子7A8JT和受体菌JM109的生长曲线相似，但前者对于后者有竞争优势，未发现质粒pHN7A8对宿主菌产生适应...
本研究旨在克隆绵羊ApoER2基因，构建ApoER2-siRNA质粒载体，研究ApoER2基因沉默对睾丸共培养细胞Sel P和PHGPx表达的影响。利用RT-PCR技术，克隆ApoER2序列，在此基础上构建4种pGPU6/GFP/Neo-ApoER2-siRNA质粒表达载体，利用脂质体将其转染到体外共培养绵羊睾丸细胞中，采用Real-time PCR和Western blotting方法，检测其抑...
旨在预测羊口疮病毒(ORFV)ORF125蛋白结构及其在真核表达质粒转染细胞中的定位。设计引物PCR扩增ORF125基因，并将其定向克隆至pEGFP-N1真核表达载体，经酶切鉴定及序列测定后得到阳性重组表达质粒pEGFP-ORF125。利用DNAStar和MEGA4.0元件分析不同毒株间ORF125基因的遗传进化关系，接着通过在线Expasy工具预测其二级结构并与Bcl-2家族成员进行比较。利用脂...
为了解食品动物源沙门氏菌质粒介导喹诺酮类耐药性(Plasmidmediated quinolone resistance,PMQR)，采用微量肉汤稀释法和PCR方法，检测了316株食品动物源沙门氏菌对20种抗菌药物的敏感性，以及菌株中PMQR基因的携带率。结果显示：316株沙门氏菌对20种抗菌药物呈不同程度的耐药性，95.57%菌株为多重耐药菌；316株菌中未检出qnrA 、qnrC 、qnrD...
为了解食品动物源沙门氏菌质粒介导喹诺酮类耐药性(Plasmidmediated quinolone resistance,PMQR)，采用微量肉汤稀释法和PCR方法，检测了316株食品动物源沙门氏菌对20种抗菌药物的敏感性，以及菌株中PMQR基因的携带率。结果显示：316株沙门氏菌对20种抗菌药物呈不同程度的耐药性，95.57%菌株为多重耐药菌；316株菌中未检出qnrA 、qnrC 、qnrD...
杂色鲍哈维弧菌耐药质粒的鉴定和分析
哈维弧菌 耐药质粒 sulⅡ基因
2012/8/13
文章对引起杂色鲍（Hallotis diversicolor）肌肉萎缩症的病原菌哈维弧菌（Vibrio harveyi）质粒上的磺胺耐药基因进行研究，结果显示，该菌株对复方新诺明完全耐药，其质粒上含有sulⅡ耐药基因。接合转化试验显示该质粒具可转移性，可使受体菌对磺胺制剂复方新诺明产生耐药性，鉴定为耐药质粒，并测定了该耐药质粒的全基因组序列，序列总长为10 940 bp，初步分析显示有7个具有一定...
本研究旨在构建小反刍兽疫病毒(PPRV)的辅助质粒和微型基因组并验证其功能，为建立PPRV反向遗传操作平台奠定基础。首先构建表达PPRV分离株China/Tib/07的N、P和L蛋白的辅助质粒pCIN、pCIP和pCIL。通过间接免疫荧光试验验证3个辅助质粒转染细胞后的蛋白表达情况，并从mRNA水平上验证蛋白表达的正确性；扩增PPRV基因组两末端序列和eGFP报告基因，三者通过overlap...
血管内皮生长因子（VEGF）实时荧光定量PCR质粒标准品的构建
实时荧光定量 VEGF基因 质粒标准品
2012/2/15
应用SYBR Green荧光染料检测方法构建VEGF基因质粒标准品，能快速、灵敏、可靠的检测与临床多种疾病密切相关的重要候选基因血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况。本研究利用版纳微型猪近交系4~6月龄猪，提取皮肤创面总RNA，设计特异引物，进行RT PCR扩增。纯化目的片段并与pMD18T载体连接，转化宿主菌DH5α，提取重组质粒DNA，并经酶切、PCR和测序鉴定，计算重组质粒原液拷贝数浓度并...
分析CpG基序与猪IFN-γ基因组合的重组表达质粒对口蹄疫灭活抗原的免疫佐剂效应。以亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活病毒为抗原，与含有猪IFN-γ基因和CpG基序的重组质粒配伍，采用肌肉注射法免疫小鼠，加强免疫后检测口蹄疫特异性抗体和中和性抗体水平、T淋巴细胞增殖反应、体内细胞毒性T细胞杀伤反应以及细胞因子IL-4、IL-6和IFN-γ的分泌水平。发现猪IFN-γ和CpG 基序双因子重组质粒相对单一的因子能诱导...
将干扰素-γ、猪圆环病毒Ⅱ型ORF2主要抗原表位（47—85位AA）和猪细小病毒VP2基因克隆至pCI-neo真核载体中，构建重组质粒pCI-IFN-γ.ORF2.VP2。用脂质体介导法将其转染到MDBK细胞中，利用RTPCR和间接免疫荧光法检测产物的表达情况。将重组质粒pCI-IFN-γ.ORF2.VP2、pCI-ORF2.VP2、对照质粒pCI-neo、PBS、猪细小病毒灭活苗和猪圆环病毒亚...
旨在分析生长抑素重组质粒pEGS/2SS转染HeLa细胞（人宫颈癌上皮细胞）转染效果的影响因素，探讨最佳转染条件，为进一步研究生长抑素基因疫苗的作用机制和作用效果奠定基础。以脂质体转染法将带有绿色荧光蛋白（GFP）报告基因的重组质粒pEGS/2SS转染HeLa细胞，探讨质粒转染HeLa细胞最佳条件的4个参数：质粒DNA剂量、脂质体剂量、最佳转染时间和质粒提取方法，在荧光显微镜下观察细胞转染情况并计...