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RNAi是用来沉默特定基因的一个强有力的研究工具，并为基因治疗策略带来新希望。目前已经用于治疗肿瘤、乙型肝炎、老年性黄斑变性等疾病。RNAi的效应分子为小分子干扰RNA(siRNA)，然而裸siRNA自身具有电负性、分子量大、极性强、半衰期短，以及容易被内源酶降解和肾小球滤过等缺陷，使其临床应用受到极大的限制。如何通过对siRNA进行化学修饰和载体构建，包括运用病毒性载体和非病毒性载体，以提高si...
靶向P75的siRNA对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
乳腺癌 P75 siRNA
2013/11/14
构建P75 特异小干扰RNA(siRNA) 表达载体，并观察其对神经生长因子(NGF) 促乳腺癌细胞生长及凋亡的影响。 方法 通过GenBank提供的P75 mRNA序列，设计3对能转录短发夹状RNA的DNA序列，构建pSilencer?4.1-CMV neo质粒重组载体，转染乳腺癌SKBR3细胞；通过实时荧光定量PCR和Western blot筛选RNA干扰效果最强的干扰片...
研究siRNA干扰鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1（ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1， OAZI-1）的表达对小鼠黑素瘤B16-F1细胞增殖的影响。 方法： 构建OAZI-1特异性siRNA表达质粒psilencer2.1-U6/OAZI-1及对照psilencer2.1-U6/scrambled质粒，脂质体转染法将质粒转染入B16-F1细胞，W...
siRNA对生长抑素基因表达的抑制作用
生长抑素 RNA干扰
2009/8/12
目的: 研究siRNA对生长抑素(SOM)基因表达的抑制作用. 方法: 根据生长抑素基因序列设计和合成RNA干扰的靶序列, 应用RiboMAXT7体外转录试剂盒合成siRNA并转染胃癌细胞系SGC-7901, 经RT-PCR, 免疫组化法检测生长抑素在mRNA和蛋白质水平的抑制效应. 结果: 成功合成了siRNA(21 bp). 胃癌细胞系SGC-7901中SOM基因的表达呈强阳性, 分布在胞质中...