搜索结果: 121-135 共查到“生物学 cDNA”相关记录359条 . 查询时间(0.14 秒)
6种重要经济鱼类生长激素完整cDNA的克隆和序列分析
生长激素 完整cDNA 序列分析
2008/1/20
摘要通过RT-PCR、3′-RACE、5′-RACE方法，从6种重要经济鱼类——大眼鳜(Siniperca kneri)、石斑鱼(Epinephelus coioides)、黄鳝(Monopterus albus)、鲶鱼(Silurus asotus)、泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)和方正银鲫(Carassius auratus gibelio Bloch, Fang...
摘要运用“数据库消减杂交”（Digital Differential Display）方法来筛选人类睾丸特异表达新基因，获得了有差异显示的代表新基因的克隆重叠群，挑选其中一个克隆重叠群HS.129 794进行多组织RT-PCR，初步证实该重叠群在人睾丸中有高表达。然后从包含该重叠群的IMAGE克隆出发，采用生物信息学的方法快速克隆了一个人类新基因的全长cDNA序列，其全长2430 bp,开放阅读框...
大熊猫垂体泌乳素（PRL）cDNA的克隆与表达
大熊猫 垂体泌乳素cDNA克隆 表达
2008/1/20
摘要 从大熊猫脑垂体中提取总RNA，利用RT-PCR技术，首次扩增出大熊猫垂体泌乳素（PRL）cDNA序列（GenBank登录号AY161285）。结果表明，大熊猫PRL cDNA的开放阅读框为687 bp，编码含229个氨基酸残基的前体蛋白。将克隆的PRL cDNA片断构建到表达质粒pGEX-4T-1中，转化大肠杆菌BL21，在异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）的诱导下表达PRL蛋白。SDS-PAG...
以双脱氧链终止法测定dG、dC接尾的cDNA克隆序列
双脱氧链终止法 dG、dC接尾 cDNA克隆序列
2008/1/17
组建重组克隆常采用均聚加尾法，即以dG尾加在经Psi I酶切的质粒载体上，dC尾加在待克隆的双链。DNA分子上，这样产生的带有均聚尾的重组克隆给双脱氧链终止法［2, 3]侧定序列带来很大的困难，即接尾后的序列往柱不能阅读。我们对序列测定的某些步骤进行了修改，使接尾后的序列清晰可读。
银环蛇心脏毒素类似物cDNA的克隆Cloning and Characterization of cDNAs of Cardiotoxin-likeProtein in Bungarus multicinctus Venom Gland
心脏毒素类似物 银环蛇 全长cDNA
2008/1/16
摘要采用SMART技术和RT-PCR方法，从同一个银环蛇毒腺中克隆到了5 种尚未报道过的心脏毒素类似物全长cDNA序列（MNCTL1-a、MNCTL1-b、MNCTL1-c、MNCTL1-d和MNCTL2）。5种序列中，MNCTL1-b、MNCTL1-c、MNCTL1-d和MNCTL2的长度均为505 bp，包括5′非翻译区32 bp，3′非翻译区212 bp和其余261 bp组成的一个完整开放阅...
黄盖蝶抗冻蛋白的分离与cDNA克隆＊
黄盖蝶 抗冻蛋白 cDNA克隆
2008/1/16
五十年代末，六十年代初，国外学者从极地鱼类中发现并分离出能使血液冰点降低的抗冻物质。这种物质分为塘蛋白及抗冻肤两类。人们以美洲拟蝶(Pseudopleuronecscs americanus）等为材料，对抗冻肚的性质、一级结构、mRNA,基因表达等都进行了研究。有关抗冻肤的作用机理以及基因的表达调节都是学者注意的中心。对抗冻蛋白基因的研究，在理论上可以使人们了解鱼类血清冰点降低的遗传基础，研究基因...
应用聚合酶链反应改造蛙鱼生长激素cDNA
聚合酶链反应 蛙鱼 生长激素 cDNA
2008/1/15
为了在大肠杆菌中表达天然序列的娃鱼生长激素基因，本研究应用聚合酶链反应扩增方法改造娃鱼生长激素cDNA，成功地扩增出编码蛙鱼生长激素成熟肤的序列，并在该序列的5端和3端分别引人EcoRI和BamHI的识别序列，使之便于进入载体，获得亚克隆。结果表明：应用聚合酶链反应扩增及分子克隆方法改造蛙鱼生长激素cDNA较传统的DNA重组方法简便，效率高。文中对聚合酶链反应扩增中非预期突变进行了讨论。
摘要利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法, 克隆黄粉甲虫(Tenebrio molitor)抗冻蛋白基因cDNA片段并进行序列分析和原核表达。同源性分析表明, 获得9条新cDNA片段, 与黄粉甲虫抗冻蛋白基因家族的其他基因序列具有较高的同源性。重组质粒pGEX-4T-1-tmafp-XJ430, 转化E.coli BL21进行原核表达, SDS-PAGE分析结果表明, 抗冻蛋白基因以可...
一步3’RACE快速构建鸡MnSOD全长cDNA克隆Rapid Construction of Full-length MnSOD cDNA of Chickens by One-step 3’RACE
RACE 触减PCR MnSOD cDNA
2008/1/8
摘要
本研究尝试将触减 PCR与3’ cDNA末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends，RACE）技术进行结合，仅用一条特异性引物和一条通用引物，成功地实现了从3’末端cDNA库对鸡含锰超氧化物歧化酶（manganese-containing superoxide dismutase，MnSOD）全长cDNA的一步3’RACE快速构建。与常规使用的末端PCR...
摘要
PPAR基因是近年发现的与脂类代谢有重要关联的核受体基因。本项研究参考鸡、人类、啮齿类等动物的PPAR基因序列，用RT-PCR方法首次获得了鹅PPARα和PPARγ基因的cDNA序列，2个基因CDS长度分别为1407bp和1428bp。鹅与鸡、人、鼠等5种动物PPARα基因、PPARγ基因CDS序列同源性分别为87.43%、92.00%，氨基酸序列同源性分别为93.38%、96.95%。进...
中华眼镜蛇短链神经毒素cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达
大肠杆菌 神经毒素 RT-PCR 表达
2008/1/7
利用RT-PCR 技术从中华眼镜蛇毒腺组织中成功地克隆了短链神经毒素cDNA。测序结果表明，该基因开放阅读框架编码83个氨基酸残基，其中21个为信号肽，成熟肽为62个氨基酸残基。该基因与GenBank 报道的相同物种的神经毒素基因有相当的同源性，不同物种之间的信号肽序列十分保守。将短链神经毒素cDNA再经PCR扩增除去信号肽序列，克隆到pT7ZZ表达质粒中，转化E. coli BL21(DE3)后...
一种改进的cDNA文库固相构建法
cDNA文库 固相构建 磁珠 天麻抗真菌蛋白
2008/1/7
本文介绍一种新的cDNA文库固相构建法。文库构建过程中，cDNA的合成和修饰全部在固相介质――磁珠上完成,简便、迅速、文库质量高，能满足不同目的的cDNA文库构建，是一种值得借鉴和应用的好方法。
摘要 利用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术克隆了一条由左侧视网膜剥夺造成左前脑差异表达EST片段的全长cDNA序列 ,同源性比较后认定 ,其为鸽e(r)基因 .该基因与人类及斑马鱼等脊椎动物e(r)基因的同源性非常高 ,但C端有明显差异 .RNA斑点杂交、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)及Northern印迹等方法检测 ,该基因在不同组织中表达量有差异 .结果表明 ,鸽e(r)基因在左眼...
摘要 本文以新鲜猪胰脏为材料,采用异硫氰酸胍法和寡聚(dT)-纤维素亲和层析法,提取了Poly(A)~+RNA,经麦胚无细胞体系鉴定其体外翻译活性,~3H-Leu参入量为空白对照的5倍。参照Gubler和Hoffman等人的方法,以此poly(A~+)RNA为模板,合成总cDNA,并采用多聚物加尾法,与pUC19质粒重组,转化入感受态E.coliJM107,进行分子克隆,其转化率为3.6×10~4...