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中英泰菲启动动物健康联合研究计划
动物 疾病 猪瘟 禽流感
2018/9/28
来自英国、中国、菲律宾和泰国的科学家2018年9月25日至26日在北京召开会议，着重讨论正迅速成为全球挑战的猪和家禽疾病，并寻求解决方案。会上启动了中、英、泰、菲四国动物健康联合研究计划，以应对地区范围内猪瘟和禽流感疫情。
鸭肠炎病毒（duck enteritis virus，DEV）疫苗株自1960年以来一直被用于防控DEV感染，该疫苗安全稳定、生产技术成熟、可快速诱导机体体液免疫和细胞免疫。DEV的基因组庞大，复制非必需区多，可容纳多个外源基因的插入，被广泛用来作为基因工程载体来开发疫苗。当前，尚未见仅针对DEV疫苗株的实时荧光定量PCR检测方法相关研究报道。本研究通过分析DEV疫苗株和强毒株UL2基因特点，明确...
本研究的目的是分离、鉴定牦牛源牛轮状病毒（bovine rotavirus，BRV）。将经RT-PCR检测BRV阳性的牦牛腹泻粪便样本接种MA-104细胞，进行病毒分离和鉴定，并对其VP4、VP6和VP7完整基因进行测序，分析其分子特征。结果显示：病毒盲传3代后出现细胞病变，至第7代后出现细胞病变的时间稳定，经蚀斑纯化后测得病毒滴度为108.39TCID50·mL-1。分离株经RT-PCR、间接免...
为了灵敏而便捷的检测猪圆环病毒3型（PCV3），根据PCV3 ORF2基因组保守序列设计合成4对引物，先使用荧光染料（SYBR）定量PCR法验证其能否有效扩增目的片段，并根据结果和引物对所扩增序列的交集进一步设计TaqMan探针，通过优化反应条件和反应体系建立快速检测PCV3的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示，SYBR染料法和TaqMan探针法均能有效地扩增PCV3标准质粒以及其他阳性样品，并...
猪圆环病毒3型LAMP检测方法的建立与应用
猪圆环病毒3型 RT-LAMP 检测
2018/6/26
为快速诊断和检测猪圆环病毒3型（PCV3），本研究根据其ORF2基因保守序列，设计特异性引物，并通过Bst DNA聚合酶、引物最佳浓度比例、Mg2+、dNTPs和甜菜碱浓度及反应条件优化，建立了环介导等温核酸扩增（LAMP）检测方法。结果显示，59℃恒温扩增36 min即可出现梯形条带，且产物亦可通过SYBR Green Ⅰ染色进行判断。该方法最低检测限为1.0×101copies·μL-1，与猪...
猪Beclin1基因调控伪狂犬病病毒诱导细胞自噬和凋亡的机制分析
PRV 细胞自噬 细胞凋亡 Beclin1
2018/6/26
旨在研究伪狂犬病病毒（PRV）感染后细胞自噬和凋亡情况，进一步分析鉴定PRV感染条件下与Beclin1互作的猪宿主凋亡家族蛋白。利用免疫印迹（WB）方法检测PRV感染细胞的自噬水平；利用流式细胞术探讨凋亡水平；最后利用免疫共沉淀试验分析PRV感染PK-15细胞中Beclin1与Bcl-2和Bcl-xL的结合水平。结果显示，PRV感染导致LC3-Ⅱ的表达明显增多，而P62显著下降，且AKT（S473...
广西某市屠宰猪淋巴结猪圆环病毒3型的病原检测及遗传演化分析
猪圆环病毒3型 全基因 序列分析 遗传演化分析
2018/6/26
为了解猪圆环病毒3型（PCV3）在广西地区健康猪群中的遗传变异情况，对广西某市屠宰场健康猪的181份淋巴结进行PCV3的病原检测，结果PCV3阳性率为24.31%。这说明在健康屠宰猪群中PCV3的感染率较高，带毒情况较为严重。对其中的阳性样品进行全序列扩增，最终得到6条PCV3全基因组序列。将试验所得PCV3全基因组序列与GenBank上已发表的国内外毒株全基因组序列相比较，结果发现PCV3全基因...
旨在构建变异猪流行性腹泻病毒（PEDV）的M和N双基因融合质粒，并分析表达蛋白免疫原性。通过扩增变异PEDV FJFQ2014毒株（GenBank登陆号KJ646580）的M基因和N基因，将M基因克隆至pEASY-Blunt E2（pE2）表达载体，构建出pE2-M质粒。利用同源重组原理，采用无缝拼接试剂盒将N基因克隆至E2-M片段，转化到Trans 1-T1感受态细胞中，构建出pE2-M-N融合...
GP5蛋白被认为是猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导中和抗体的主要蛋白，为探讨GP5蛋白诱导免疫保护的能力，本研究用杆状病毒/昆虫表达系统分别表达了全长和截短的GP5蛋白，同时用大肠杆菌表达系统表达了截短的GP5蛋白。三种重组蛋白经纯化后，免疫小鼠制备抗血清，以PRRSV全病毒作为ELISA包被抗原检测抗血清时，原核表达的截短GP5蛋白抗血清效价为1∶200，真核表达的全长GP5蛋白抗血清效价为1∶800...
为研究肿瘤进行性位点2（TPL2）在仓鼠肾细胞（BHK-21）中对口蹄疫病毒（FMDV）复制的影响，使用FMDV感染BHK-21细胞，通过qRT-PCR技术检测FMDV感染对内源性TPL2转录水平的影响；根据GenBank公布的TPL2基因序列（NM007746.2）设计构建TPL2的真核表达质粒以及设计并合成宿主TPL2的RNAi序列，利用脂质体方法转染BHK-21细胞，通过qRT-PCR和We...
草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型是导致草鱼出血病的主要病原体之一，目前在我国广泛流行。本研究根据GenBank中草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型基因序列，设计了草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型特异性探针和PCR引物，通过优化反应条件，建立了草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型一步法TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。试验对反转录和PCR反应体系进行摸索，通过优化的冻干工艺制备出草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型全预混RT-PCR试剂，在荧光定量PCR中，冻干试剂的检...
中国科学院昆明动物研究所揭示TRIM5α和TRIMCyp协同限制HIV-1复制作用机制（图）
中国科学院昆明动物研究所 TRIM5α TRIMCyp HIV-1 复制作用机制 固有病毒
2018/5/29
宿主的固有病毒限制因子可直接作用于HIV-1等逆转录病毒，破坏病毒正常的生活周期以达到限制病毒复制的作用。目前发现的逆转录病毒限制因子主要有APOBEC3、TRIM5α、TRIMCyp、ZAP、Tetherin、SAMHAD1及Mx2等。宿主病毒限制因子对逆转录病毒的复制具有物种特异性的限制能力，这也是构建合适动物模型的障碍，其中TRIM5α/TRIMCyp在限制HIV-1感染灵长类动物中至关重要...
发表在《免疫》杂志上的一项临床前研究显示，膳食纤维通过将免疫系统设定在健康的反应水平上，提高了感染流感病毒小鼠的存活率。高纤维饮食会钝化肺部有害的过度免疫反应，同时激活T细胞，从而提高抗病毒的免疫力。这些益处是由肠道细菌组成的变化调节的，膳食纤维的生物发酵增加了短链脂肪酸的产生。
20世纪70年代，研究人员对中美洲云林中的树蛙和其他两栖类动物的快速且不明原因的死亡感到困惑。当爬行动物学家意识到世界各地两栖动物的数量均在减少，且一些物种濒临灭绝时，他们的担忧随之增加。直到1998年，他们才发现了罪魁祸首：一种被称为蛙壶菌的真菌会损害皮肤，导致这些两栖类动物心脏衰竭。但该真菌起源于何时何地却是个谜。现在，蛙壶菌的四个遗传谱系已经知晓，其中欧洲、非洲和巴西各有一个谱系，但致命且易...
2018年4月10日，动科动医学院第一届国际前沿研讨会在生猪健康养殖协同创新中心102会议室举行。本次会议由“千人计划”专家傅振芳教授主持，特邀托马斯杰斐逊大学的D.C Hopper教授、Matthias Schnell教授和威斯康星医学院的Rodney Willoughby教授参加会议。