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2021年11月15日前，由中国水产科学研究院南海水产研究所吴燕燕、马永凯、李来好等发明的“一种利用定点突变和分子修饰技术改造的珍珠贝肉抗氧化肽及其构建和制备方法”获得国家发明专利授权，专利号为ZL201710175030.X。该发明抗氧化肽活性高、纯度高，制备速度快、成本低，提供构建方法和制备方法自动化程度高，可实现全程自动化无人管理，大大节约人力成本。
定点突变对谷胱甘肽转移酶的结构和功能影响研究（图）
定点突变 谷胱甘肽 转移酶
2021/1/12
基因突变是物种群体遗传多样性的重要来源之一。在群体进化的过程中，某些重要的功能基因位点的突变，以及突变的累积是否会引起基因表达的酶或蛋白结构功能的变异从而影响整个植物群体的适应性？是我们期望能够在群体的水平上开展功能研究的重要基础。因此版纳植物园协同进化研究组高洁与吉林农业大学合作者以植物中一类重要的抗逆蛋白谷胱甘肽转移酶（GSTs，一种依赖还原性的谷胱甘肽（GSH）完成亲电毒性物质解毒或消除各种...
重组鱼腥藻脂肪氧合酶定点突变及突变酶酶学性质研究
脂肪氧合酶 定点突变 酶学性质
2016/6/28
重组鱼腥藻脂肪氧合酶(Ana-LOX)基因来自于Anabaena sp.PCC 7120。利用定点突变技术将Ana-LOX的421位和40位的缬氨酸(Val)突变为丙氨酸(Ala),获得突变体V421A、V40A和V421A/V40A。野生型Ana-LOX在50℃下半衰期为3.8 min。而突变酶V421A和V40A在50℃的半衰期分别为4.4 min和7.0 min。突变酶V421A/V40A的...
金黄色葡萄球菌新型耐热核酸酶(Nuc2)的定点突变与特性分析
金黄色葡萄球菌 新型耐热核酸酶 定点突变 二级结构
2016/6/28
本研究选取了F60、A62、T102和Y135这4个可能的关键位点,采用定点突变的方法成功构建了5个Nuc2的单点和多点突变体。体外表达并纯化这些核酸酶,对其活性、耐热性和二级结构进行测定。结果表明:经方差分析(p0.05),T102M和F60A/A62L/T102M/Y135V的核酸酶活性与野生型相比较显著下降,并且F60A/A62L/T102M/Y135V的酶活性基本丧失;T102M和F60A...
【目的】研究家蚕Bombyx mori磷酸吡哆醇氧化酶（pyridoxine 5′-phosphate oxidase， PNPO）个别保守氨基酸残基对PNPO酶活性的影响。 【方法】用重叠延伸法把氨基酸残基Lys111（AAA）突变为Glu（GAA）， Ser160（AGC）定点突变为Ala（GCC）； 构建重组表达载体， 在大肠杆菌Escherichia coli Rosetta中诱导表达， ...
W544是Cry1Ac蛋白上独特于其它Cry类蛋白的一个氨基酸, 它与F578和F604一起组成一个“螺旋桨状”的疏水簇, 通过疏水相互作用维持蛋白的三维结构稳定. 本研究通过定点突变将W544保守地替换为苯丙氨酸, SDS-PAGE分析结果表明其纯化的原毒素对紫外照射、胰蛋白酶处理和室温存贮的稳定性相对于野生Cry1Ac都有一定程度的提高; 经原子力显微镜观察, 发现W544F产生的晶体两个顶点...
定点突变技术在DNA缺失改造上的应用
蛋白质工程 定向点突变
2008/2/3
摘要本实验采用寡聚核苷酸指导的定点突变法，缺失了分别存在于YFD42和YFD58中的α-因子信 号肽序列与α-hANP基因和α-因子信号肽序列与α-IFN基因间接头区域的27和18个核苷酸。 由于被缺失部分恰好含有一个酶切位点，利用这一特点，酶切检查初步筛选出缺失了一个Hi udⅢ酶切位点的突变子。经DNA序列分析，证实缺失的核苷酸序列和设计完全一致。
蛇毒锯鳞蝰素基因Leu14-Lys15-Glu16的定点突变
蛇毒锯鳞蝰素 PCR 定点突变 抑制血小板凝集活性
2008/1/23
本研究的目的是利用蛋白质工程定点突变的方法,在蛇毒锯鳞蝰素基因分子上增加另一个保守序列RGD(14位精氨酸残基, 15位甘氨酸残基,16位天冬氨酸残基), 以其增加该分子的生物活性,并探讨蛋白质一级结构,空间结构和功能的关系。在质粒pJC264的基础上,利用PCR定点突变方法,对蛇毒锯鳞蝰素基因Leu14-Lys15-Glu16进行定点突变,使相应的DNA片段变成表达Arg14-Gly15-Asp...
脂蛋白脂酶基因的克隆、序列测定及定点突变
脂蛋白脂酶 冠心病 基因突变 定点突变
2008/1/5
摘要 以人的脂肪组织总RNA为模板 ,参考已报道的脂蛋白脂酶 (lipoproteinlipase ,LPL)cDNA设计引物 ,利用RT PCR方法扩增得到了LPLcDNA ,并经序列测定证实其序列是正确的 .在冠心病患者LPL基因第 5外显子的 830位碱基处发现了G→A的转换 ,该变异导致LPL基因第 192位的密码子CGA被CAA取代 ,使LPL第 192位精氨酸改变为谷氨酰胺 .在变异碱...
一种新型的基因定点突变方法及其在DdsA突变研究中的应用
基因突变 平端酶切位点 定点突变 DdsA变体
2008/1/4
摘要 为了发展基因突变技术,介绍一种新型的基因定点突变方法.该方法巧妙利用了基因序列中广泛存在的不完整的平端酶切位点.与传统方法相比，可以迅速地在全基因的任何部位替换核苷酸，并可以在突变实验过程中直接将目的基因克隆到T载体上，便于测序及进一步克隆.利用该方法成功地获得了DdsA（decaprenyl diphosphate synthase，十聚异戊二烯焦磷酸合成酶）在4个氨基酸位点上的19个变体...
摘要 E.coli RNA聚合酶ββ'亚单位编码的基因rpoBC与核糖核蛋白基因rplJL共同构成rpoBC操纵子。rpl-rpo间区转录终止信号~tL7的转录产物RNA有两组富含C-G的反向对称结构及一串寡聚U;反向对称区可形成1:2和3:4茎环或单一5:6茎环。 用M13mp11噬菌体插入~tL7的112bp片段重组M13mp11-490,在此基础上用定点突变技术建立~tL7的七核苷酸缺失突变...
定点突变人α_(99)、β_(82)位的血红蛋白及在大肠杆菌中的表达
血红蛋白 大肠杆菌 定点突变
2007/12/20
摘要 模拟分析发现血红蛋白两条α珠蛋白链上 99位的 Lys突变为 Cys后 ,它们之间可以形成二硫键 ,两条β珠蛋白链上 82位的 Lys突变为 Cys后可以增加血红蛋白四聚体间氢键的作用 ,分别起到稳定四聚体的作用 .利用寡核苷酸介导的定点突变技术将α99、β82 位的 Lys突变为 Cys.将突变后的血红蛋白插入 p BV2 2 0载体 ,在大肠杆菌中获得了高效表达 ,其表达产物达细菌总蛋白...
摘要 胰高血糖素是由 2 9个氨基酸组成的多肽激素 ,具有促糖元分解的生理功能 ,其拮抗剂有治疗糖尿病病人的潜在应用价值 .在获得重组胰高血糖素基因工程菌基础上 ,利用定点突变技术改造其第 2 1位氨基酸天冬氨酸为丙氨酸 ,并经DNA测序证明胰高血糖素基因发生了点突变 .用IPTG诱导表达后 ,经亲和层析和反相高效液相层析 ,纯化到突变型重组2 1Ala 胰高血糖素 .质谱测定分子量与理论值相符 ...