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IBP表达抑制后活化T淋巴细胞基因表达谱变化分析
干扰素调节因子-4结合蛋白 T淋巴细胞 基因芯片
2013/4/8
利用全基因组寡核苷酸芯片检测干扰素调节因子-4结合蛋白(IRF-4 binding protein,IBP)表达抑制后活化T淋巴细胞基因表达谱的差异。 方法 采用本室构建的IBP表达抑制的Jurkat T细胞及相应对照细胞为实验对象,Anti-CD3、CD28 mAb处理细胞后提取刺激24、48 h的细胞总RNA,利用北京博奥生物有限公司22K Human Genome Arr...
构建pEGFP-N1-ZIP2 真核表达载体,观察其在人T淋巴细胞系Jurkat-E6-1和人单核细胞细胞系THP-1中的表达,并检测ZIP2在两种细胞系中过表达及其对其他锌转运体的影响。方法 利用外周血经RT-PCR扩增获得人ZIP2 cDNA序列,将其与pEGFP-N1定向连接,构建完成转染细胞48h后,通过RT-PCR检测ZIP2过表达情况,并检测ZIP1、ZIP6、ZIP8、ZIP10...
构建pEGFP-N1-ZIP10表达载体,观察其在乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中的表达,并检测ZIP10过表达对其他锌转运体的影响。方法 从外周血经 RT-PCR扩增ZIP10 cDNA序列,并将其定向克隆至真核表达质粒pEGFP-N1中,pEGFP-N1-ZIP10经酶切及测序鉴定后,转染乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞,RT-PCR检测ZIP10的表达及其他锌转运...
有效EDRF启动子驱动GFP基因表达的研究
红系分化相关因子 启动子 基因表达 绿色荧光蛋白
2012/7/2
通过克隆不同长度红系分化相关因子(EDRF)基因启动子,驱动GFP基因的表达,探讨EDRF启动子的特点。方法 用PCR扩增5种不同长度的EDRF启动子(长度分别为697、496、484、372、283bp),并将启动子分别克隆至pcDNA-GFP载体上,构建驱动GFP表达载体后,转染NIH3T3和MEL细胞,采用荧光显微镜、流式细胞术比较不同长度启动子的活性。结果 经荧光检测,在NIH3T3和...
研究罗格列酮在不同浓度葡萄糖条件下,对胰岛β细胞增殖凋亡与胰岛素分泌以及叉头转录因子-1(FOXO1)和结节性硬化症-2(TSC2)表达的影响。方法: 将 NIT-1细胞按每孔5×10个放置于24孔细胞培养板,培养48 h后随机分为各处理组:5.6、7.8、11.1、16.7、22.2 和27.6 mmol/L葡萄糖组,继续培养24 h后再分别施加1×10-5mol/L罗格列酮,分别于干预24和4...