搜索结果: 1-15 共查到“生物学 酵母双杂交”相关记录17条 . 查询时间(0.195 秒)
利用膜蛋白酵母双杂交系统构建人尿道上皮细胞cDNA文库
膜蛋白酵母双杂交 人尿道上皮细胞 cDNA文库
2018/10/16
利用基于分离的泛素介导的膜蛋白酵母双杂交技术,构建人永生尿道上皮细胞(SV-HUC-1)cDNA文库。Trizol法提取人尿道上皮细胞总RNA,并分离纯化其mRNA；以mRNA为模板,合成cDNA第一链、第二链；通过T4 DNA聚合酶将DNA链两端加上5′接头；并将其大于1 kbp的片段与膜蛋白酵母双杂交载体pPR3-N连接,经电转化大肠杆菌感受态细胞,以构建基于分离的泛素介导的膜蛋白酵母双杂交c...
昆虫错综复杂的嗅觉系统在昆虫寻找寄主、 交配、 产卵以及逃避行为中起到了至关重要的作用。因此，对昆虫嗅觉感受机理的研究将有助于揭开昆虫感受和识别环境中的气味物质并引起相关行为反应的秘密。为了更多地了解华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita Faldermann 嗅觉相关蛋白互作机制，本实验利用DUALhunter Starter Kits酵母双杂交筛选试剂盒，构建了华北大黑鳃金龟气味结...
柑橘木虱酵母双杂交cDNA文库的构建及评价
柑橘木虱 柑橘 黄龙病 酵母双杂交cDNA文库 膜蛋白 蛋白质互作
2013/9/12
为了探索研究柑橘木虱Diaphorina citri与柑橘黄龙病（Huanglongbing， HLB）病原菌的相互作用蛋白， 本研究运用RNA转录中5′末端转换机制（Switching Mechanism at 5′ End of the RNA Transcript， SMART）技术构建了柑橘木虱的酵母双杂交cDNA文库。以实验室饲养的柑橘木虱为材料， 提取总RNA， 经反转录后合成ds c...
酵母双杂交中诱饵蛋白载体的构建与鉴定方法
酵母双杂交 诱饵载体 诱饵蛋白 自激活性检测
2012/3/26
酵母双杂交已是研究蛋白质相互作用的经典方法之一。该方法以真核生物酵母为模型,在体内研究活细胞内蛋白质的相互作用,具有高度敏感性,被很多研究者采用。综述了酵母双杂交系统中诱饵蛋白载体的构建,及其在转化酵母中的毒性、自激活性检测研究的最新进展。
应用酵母双杂交系统筛选AMPK相互作用蛋白
一磷酸腺苷激活蛋白激酶 酵母双杂交 蛋白质相互作用
2012/3/23
一磷酸腺苷激活蛋白激酶 (AMPK) 是调节体内代谢平衡的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。应用酵母双杂交系统,以AMPK β1亚基作为"诱饵"蛋白,筛选均一化的人源cDNA文库,寻找与AMPK相互作用的蛋白。通过对150个阳性克隆进行验证,最终得到了63个与AMPK β1亚基相互作用的蛋白。其中,包括代谢酶、转录因子或转录相关蛋白、蛋白转运相关蛋白、GTP结合蛋白、支架蛋白、细胞周期调节蛋白、RNA结合蛋...
灰飞虱高带毒（RSV）群体酵母双杂交cDNA文库的构建
灰飞虱 水稻条纹病毒 同源重组 cDNA文库 酵母双杂交cDNA文库
2011/12/29
为了研究灰飞虱Laodelphax striatellus Fallén与水稻条纹病毒（rice stripe virus, RSV）互作机制， 本研究构建了灰飞虱高带毒群体酵母双杂交cDNA文库。以实验室筛选的灰飞虱高带毒群体为材料， 分离纯化mRNA， 反转录合成双链cDNA， 并连接三框型接头， 层析柱分级纯化。采用同源重组反应制备三框型cDNA入门文库， 再通过同源重组将入门文库转移到Ga...
蓖麻毒素B链(RTB)酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测
蓖麻毒素蛋白 酵母双杂交系统 诱饵载体 自激活
2011/8/16
采用PCR技术扩增蓖麻毒素B链基因,并克隆入诱饵载体pSos中,成功地构建了酵母双杂交诱饵载体pSosRTB。将重组质粒与对照质粒共转化入酵母菌cdc25H。结果表明:该段基因表达的蛋白对酵母菌cdc25H无毒性和无自激活作用,且在酵母细胞中定位正确。
利用修饰的随机引物构建非洲爪蟾酵母双杂交定向cDNA文库
非洲爪蟾 酵母双杂交 随机引物 定向cDNA文库
2009/6/23
描述了一种新的构建cDNA文库的方法，其中用来合成cDNA第一链的随机引物5′-端被加上碱基d（AC），在cDNA双链合成后所添加的连接头的末端含有碱基d（GTCG）。在cDNA双链3′-端，连接子连接上后会形成一个完整的SalI酶切位点d（GTCGAC），而在5′-端几乎不会形成SalI位点。在SalI酶切后利用形成的3′-粘性末端与5′-EcoRI粘性末端一起将cDNA双链定向导入线性化的质粒...
WSSV囊膜蛋白VP37和VP39基因酵母双杂交诱饵载体的构建及其激活作用检测。
用酵母双杂交系统筛选与痢疾杆菌侵袭素IpaC相互作用的蛋白
痢疾杆菌 酵母双杂交系统 IpaC 胶原酶
2008/1/21
摘要
利用酵母双杂交技术筛选与IpaC相互作用的真核细胞蛋白。首先将IpaC全长基因克隆到诱饵蛋白载体pGBKT7中，然后以构建的pGBKT-IpaC为靶蛋白质粒，筛选人HeLa细胞cDNA文库。在2×106个克隆中得到22个阳性克隆。其中2个阳性克隆编码人胶原酶蛋白片段。并且进一步证明与胶原酶片段相互作用的IpaC结构域在62aa～170aa之间。从而提示IpaC可能在胶原酶参与的生物学过程...
大规模酵母双杂交技术研究蛋白质相互作用的应用
酵母双杂交技术
2008/1/11
摘要简介了酵母双杂交技术原理, 总结了酵母双杂交技术大规模筛选蛋白质相互作用的基础、应用及存在的问题。因为大规模酵母双杂交技术结果有大量假阳性及假阴性问题, 因此, 有条件情况下有必要同时开展其他方法的大规模蛋白相互作用研究, 以构建规模更大可信度更高的蛋白质相互作用网络图。
用酵母双杂交系统研究Sm ad3和Sm ad4的相互作用
Smad3 Smad4 酵母双杂交
2008/1/4
摘要 Ｓｍ ａｄ３ 和 Ｓｍ ａｄ４ 是将 Ｔ Ｇ Ｆβ的信号从细胞外传递到细胞核内的重要的信号传导蛋白． Ｔ Ｇ Ｆβ与其受体结合后，激活受体的磷酸激酶，使 Ｓｍ ａｄ３ 发生磷酸化，活化的 Ｓｍ ａｄ３ 与 Ｓｍ ａｄ４ 结合，形成异源复合物，进入到核中．然后 Ｓｍ ａｄ４ 以 Ｄ Ｎ Ａ 结合蛋白的形式与特定的 Ｄ Ｎ Ａ 结合，将 Ｔ Ｇ Ｆβ的信号传到核内．激活转录...
摘要 为了探讨胰岛素样生长因子结合蛋白 3(IGFBP- 3)分子上的胰岛素样生长因子 1 (IGF- 1 )结合位点并找出其关键氨基酸残基组成 ,首先建立了研究 IGF- 1与 IGFBP- 3相互作用的酵母双杂交模型 ,可以定性和定量地分析两个蛋白质之间的相互作用大小 ;同时利用基因体外定点突变的方法 ,对推断出的 IGF- 1结合位点中的氨基酸突变 ,经 DNA序列分析 ,构建了 5种 IG...
To construct the bait vector with different domains of human Era in yeast two-hybrid system, then assay whether its expression product can affect the growth of yeast cells and activate the reporter ge...
应用酵母双杂交系统筛选新基因Collectrin相关蛋白
collectrin 酵母双杂交系统 蛋白间相互作用
2007/12/19
摘要 Collectrin是在小鼠 5 6肾切除后 ,在肾小球的高滤过、高增生期分离克隆的一个新基因 .通过酵母双杂交系统从人肾脏cDNA文库中筛选与collectrin相互作用的蛋白 ,可以为该基因的功能研究提供线索 .构建collectrin的真核表达载体collectrin pGBKT7 c myc ,转化酵母菌AH10 9.Western印迹证实 ,collectrin蛋白能够在酵母中正...