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东亚飞蝗FK506结合蛋白基因克隆及其免疫功能分析
东亚飞蝗 FK506结合蛋白 保护酶 金龟子绿僵菌
2021/3/25
为明确东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis免疫相关FK506结合蛋白（FK506 binding protein，FKBP）的功能，了解FKBP对金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae侵染东亚飞蝗的影响，分离克隆获得FKBP46基因及其纯化蛋白，采用荧光定量PCR方法测定FKBP46基因在东亚飞蝗成虫不同组织以及不同虫态中肠内的表达量，通过饵剂饲喂方...
斜纹夜蛾表皮蛋白基因克隆及表达谱分析
斜纹夜蛾 表皮蛋白 基因克隆 逆转录聚合酶链反应（RT-PCR） 组织表达 发育阶段
2021/1/11
【目的】分析斜纹夜蛾不同发育阶段14个表皮蛋白（Cuticular protein, CP）基因的表达方式，为深入探究CP在斜纹夜蛾生长发育过程中的功能提供参考。【方法】利用聚合酶链反应（Polymerase chain reaction, PCR）扩增斜纹夜蛾表皮蛋白基因cDNA序列，分析其核苷酸序列和相应的氨基酸序列，并使用MEGA5.2软件构建了鳞翅目系统发育树。采用逆转录PCR（Rever...
栗灰螟 Chilo infuscatellus 属鳞翅目螟蛾科，也称二点螟，主要为害我国南方的甘蔗以及北方的谷子等作物。几丁质是昆虫外表皮、围食膜等组织的重要组成部分，几丁质及对应的几丁质酶通过准确调控旧表皮蜕去、新表皮合成维持着昆虫各发育阶段的代谢平衡（Zhang et al.，2016）。通过干扰、破坏几丁质酶的合成从而影响昆虫的几丁质代谢是现代化学农药靶标的研究热点。根据Wang et al...
为明确茶翅蝽Halyomorpha halys的非典型气味受体（odorant receptor co-receptor，Orco）基因的生物信息学特征和组织特异性表达谱，采用Trizol法提取茶翅蝽成虫触角的总RNA，利用RTPCR技术克隆其Orco基因，使用生物信息学软件对茶翅蝽Orco蛋白进行跨膜区域预测、结构分析和系统发育分析，并采用实时荧光定量PCR技术测定Orco的组织表达谱。结果表明...
【目的】为探究肽聚糖识别蛋白(PGRP)基因BdPGRP-SB1在桔小实蝇Bactrocera dorsalis免疫中的作用。【方法】本研究利用PCR克隆桔小实蝇BdPGRP-SB1全长cDNA序列；利用生物信息学软件对该基因核苷酸序列及其编码的氨基酸序列特征进行分析。采用RT-qPCR分析BdPGRP-SB1在桔小实蝇不同发育阶段(卵、幼虫、蛹、成虫)及5日龄成虫不同组织(中肠、马氏管、后肠、脂...
【目的】本研究旨在克隆绿盲蝽Apolygus lucorum的气味受体基因，明确这些气味受体基因在绿盲蝽成虫不同组织中的表达水平及对主要寄主植物挥发物的电生理反应，为揭示绿盲蝽对寄主植物的识别机制提供理论基础。【方法】在绿盲蝽成虫触角转录组测序与分析的基础上，通过PCR技术克隆得到8个具有完整ORF的气味受体基因序列。用qPCR研究这8个基因在雌雄成虫不同组织(触角、无触角的头、胸、腹、足和翅)中...
为探讨草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda Hsc70基因对A区段紫外辐射（ultraviolet-A radiation，UV-A）及高、低温胁迫的响应，采用逆转录聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）技术克隆Hsc70基因并对其进行序列分析，利用实时荧光定量PCR（real-time quan...
【目的】本研究旨在通过克隆苹果蠹蛾Cydia pomonella细胞色素P450基因CYP332A19和CYP337B19，并对其进行序列和表达分析，以更好地了解这两个P450基因在植物次生物质解毒方面的作用，为进一步的功能研究提供依据。【方法】采用本地BLAST搜索苹果蠹蛾转录组数据库获得细胞色素P450基因cDNA序列，采用RT-PCR技术克隆目的基因的编码区。利用生物信息学软件分析目的基因的...
为揭示沙葱萤叶甲Galeruca daurica己糖激酶基因的功能，根据本课题组组装的沙葱萤叶甲转录组测序数据，应用cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends，RACE）克隆获得沙葱萤叶甲己糖激酶基因的cDNA全长序列，分析其编码蛋白的氨基酸序列与其它昆虫同源蛋白氨基酸序列之间的系统进化关系，采用实时荧光定量技术（real-time quantita...
【目的】克隆褐飞虱Nilaparvata lugens ATP合酶b亚基基因全长cDNA序列，并通过RNA干扰技术对该基因的功能进行研究，探讨其在褐飞虱防治中的潜在价值。【方法】根据本实验室获得的褐飞虱转录组测序数据提供的ATP合酶b亚基基因部分核心序列信息，以水稻品种TN1饲养的褐飞虱为材料，应用cDNA末端快速扩增技术（RACE）获得全长cDNA；通过实时荧光定量PCR技术研究其在褐飞虱不同发...
【目的】昆虫的气味结合蛋白(odorant binding proteins， OBPs)与嗅觉识别密切相关，在触角感受器淋巴液内运输外界的脂溶性气味分子顺利到达嗅觉受体过程中起着关键的作用。本研究对柑橘大实蝇Bactrocera minax的气味结合蛋白基因进行了克隆和表达分析，旨在更好地了解气味结合蛋白在柑橘大实蝇嗅觉识别中的作用及为进一步研究柑橘大实蝇嗅觉传递的分子机制奠定基础。【方法】利用...
黏虫咽侧体抑制神经肽基因克隆与成虫期表达模式分析
黏虫 咽侧体抑制素 克隆 表达
2018/3/16
为明确黏虫咽侧体抑制神经肽基因 (allatostatin, AST) 在调控黏虫 Mythimna separata (Walker) 保幼激素 (juvenile hormone, JH) 中的功能, 采用RT-PCR和RACE技术克隆获得的黏虫AST基因cDNA全长序列902 bp, 开放阅读框378 bp, 编码125个氨基酸。蛋白分子量为14.33 kD, 等电点为9.25, 具有C型A...
【目的】长期种植转Bacillus thuringiensis (Bt）基因作物使一些靶标害虫产生了Bt抗性，有研究表明小菜蛾Plutella xylostella 的white基因表达下调使其产生了Cry1Ac抗性，由于Pxwhite蛋白与ABC转运蛋白ABCG1同属于ABCG亚家族，我们推测棉铃虫Helicoverpa armigera ABCG1基因(HaABCG1)的表达下调可能与棉铃虫对...
【目的】克隆棉蚜Aphis gossypii Glover溶菌酶基因并进行原核表达，分析其在不同日龄和不同寄主植物上棉蚜体内的表达特征，为进一步研究溶菌酶的功能及其与棉蚜共生菌间的关系奠定基础。【方法】以无翅棉蚜成虫总RNA为模板，采用RT-PCR与RACE方法获得棉蚜溶菌酶基因的cDNA全长序列；将信号肽序列剪切后的棉蚜溶菌酶基因片段连接到原核表达载体pET-30a，并转化到大肠杆菌Escher...