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本发明涉及一种绿藻氢酶分离纯化的方法。该方法始终在无氧环境中进行，采用无氧操作袋与层析柱串联系统。将试剂、器皿放入无氧操作袋中，所有试剂均加入连二亚硫酸钠以除去溶氧，用高速珠磨法破碎绿藻细胞，粗酶液经硫酸铵沉淀、凝胶过滤层析和离子交换层析纯化后，获得纯氢酶，经SDS-PAGE检测显示单一条带。国外相似方法是将所有用到的仪器、装置放入巨大的无氧装置中，占地面积大，保护气成本高，且操作困难；国内尚无相...