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本发明涉及一种羔羊皱胃凝乳酶标准品的制备方法，该方法经过石油醚脱脂，超声波辅助提取凝乳酶，脱盐，冷冻浓缩，饱和硫酸铵梯度沉淀，离心，透析袋脱盐，冷冻干燥，得到羔羊皱胃总凝乳酶；再经阴离子交换色谱柱用氯化钠溶液梯度洗脱获得两种离子强度的凝乳酶，经透析袋脱盐，冷冻干燥得精制凝乳酶。再将两种离子强度的凝乳酶部位B1和B2分别用HPLC凝胶柱分离，得到了B1‑P1,B2‑P1,P2...