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基于TaqMan MGB探针的葡萄茎枯病菌实时荧光PCR检测方法
葡萄茎枯病菌 实时荧光PCR 检测
2020/3/13
葡萄茎枯病菌是我国进境植物检疫性有害生物。带菌植物材料是病害传播的重要载体,准确、灵敏、快速的检测方法是严格执行口岸检疫措施及研究病害防控措施的有力工具。根据葡萄茎枯病菌及其近似种的细胞骨架蛋白(Actin)基因序列差异,设计并合成1对引物和1条特异性TaqMan-MGB探针,建立了葡萄茎枯病菌的实时荧光PCR检测方法。通过对反应体系的优化,确定了葡萄茎枯病菌的实时荧光PCR最佳反应条件:引物终浓...
实时荧光PCR检测瓜炭疽病菌
实时荧光PCR 检测 瓜炭疽病菌
2017/11/13
采用实时荧光PCR技术建立了瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)的检测方法。根据瓜炭疽病菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因和谷氨酰胺合成酶(GS)基因序列, 设计了该病菌特异性引物和TaqMan探针, 并对所设计的引物和探针的反应条件进行了优化。采用本试验建立的实时荧光PCR方法对瓜上的其他菌株及近似菌株进行检测, 可将瓜炭疽病菌与其他病原菌区分开。灵敏度试验表...
梨衰退植原体Cycleave 实时荧光PCR检测方法的建立
梨衰退植原体 实时荧光PCR Cycling 探针
2013/10/22
根据植原体16SrDNA保守区设计Cycling 探针LST2probe及引物,建立了梨衰退植原体Cycleave实时荧光PCR检测方法。结果表明,探针LST2probe 能特异的检测梨衰退植原体,供试同一组内不同亚组植原体及参试病原细菌均为阴性,检测灵敏度可达0.5 pg/μL。该Cycleave实时荧光PCR检测方法可用于梨衰退植原体的快速检测,并为其他有害生物鉴定提供借鉴依据。
水稻细菌性谷枯病菌的实时荧光PCR检测技术研究
水稻细菌性谷枯病菌 检测 实时荧光聚合酶链式反应
2009/9/25
水稻细菌性谷枯病菌Burkholderia glumae于2007年被列为我国进境植物检疫性有害生物,国内急需建立针对该菌切实可行的检测技术, 以有效控制它在我国的传播。采用实时荧光PCR(realtime fluorescence PCR)和经典PCR技术进行水稻细菌性谷枯病菌检测。研究结果表明,供试所有谷枯病菌都能产生139 bp左右的特异性片段,非谷枯菌株均无特异性片段产生。两种检测方法的...
小麦印度腥黑穗病菌定性PCR、实时荧光PCR及其单孢PCR检测方法的研究
小麦 印度腥黑穗病菌
2008/9/22
本课题对小麦印度腥黑穗病菌的三种检测方法进行研究,其中应用PCR方法对小麦印度腥黑穗病菌及其近似种或相关种包括:黑麦草腥黑粉菌、狼尾草腥黑粉菌、水稻腥黑粉菌等10种腥黑粉菌共14个菌株进行了检测研究。根据线粒体DNA的序列分别设计了扩增小麦印度腥黑穗病菌的特异性引物和扩增黑麦草腥黑粉菌的特异性引物,根据核糖体内黑心录区(ITS)DNA片段设计了扩增腥黑粉菌属真菌的引物,应用PCR方法能将小麦印度腥...