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搜索结果: 1-10 共查到生物学 稳定表达相关记录10条 . 查询时间(0.224 秒)
旨在构建稳定表达SLAM受体的SLAM-Vero细胞系和SLAM-BHK21细胞系,并比较其对犬瘟热病毒(CDV)野毒株的敏感性,为CDV野毒株的快速分离与研究提供一种有效的工具。将真核表达载体Pcag-SLAM分别转染Vero细胞和BHK21细胞。经G418压力筛选结合有限稀释法筛选阳性克隆株,并通过RT-PCR、间接免疫荧光鉴定(IFA)和Western blot等方法对稳定表达SLAM受体的...
旨在构建稳定表达绵羊NYD-SP27基因的BHK-21细胞株,对NYD-SP27基因的表达特征进行分析,为进一步研究NYD-SP27基因功能奠定基础。本研究克隆绵羊NYD-SP27基因,并将其插入到真核表达载体pDsRed1-C1中,利用猪捷申病毒2A肽(P2A)将NYD-SP27蛋白和红色荧光蛋白连接以实现共表达,将重组质粒pDsRed-P2A-Flag-NYDSP转染至BHK-21细胞中,经G...
Human immunodeficiency virus-1(HIV-1)辅助蛋白在其感染和艾滋病发病过程中起着非常重要的作用。Regulator of expression of virion proteins(Rev)作为HIV-1辅助蛋白之一,可以调节病毒结构蛋白mRNA出核转运和蛋白表达,对于病毒的复制至关重要。为研究Rev蛋白对靶细胞表型和功能的影响,本实验采用电穿孔的方法,将HIV-1...
APP在AD病因学中是一个重要的分子,但到目前为止尚缺乏良好的动物和细胞模型用来探讨APP在AD发病中的作用。本研究旨在建立过表达人APP基因C-末端片段的遗传工程细胞系。将人APP695cDNA 中编码C-末端105 个氨基酸的片段重组到真核表达载体pDORneo中形成重组质粒pDORneo-CT, 然后用脂质体将其转染到大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)中。用800μg/ml G418 筛选...
摘要 用 EPO基因组基因构建了腺病毒质粒型载体 psp1 B/h EPO,该质粒含有以 RSV- LTR为启动子的完整的 EPO基因表达盒 .单独转染 CHO细胞 ,经暂态表达检测到 EPO的表达。用 psp1 B/h EPO与腺病毒拯救型载体 p BHG1 1共转染 2 93细胞 ,获得了表达 EPO的重组腺病毒 Adh EPO.经 Southern杂交证实 Adh EPO中有 EPO表达盒 ...
摘要 干细胞因子 (SCF)是一种重要的造血因子 ,其受体c Kit具有酪氨酸激酶活性 .SCF c Kit介导的细胞内信号转导在造血、肥大细胞的生成及其功能、以及生殖细胞和黑色素细胞的发育中起着关键的作用 .通过构建人c kitcDNA的pcDNA3.1真核表达载体 ,转染不表达人c kit的小鼠髓系祖细胞FDC P1.经Zeocin抗性筛选 ,PCR、RT PCR、Western印迹分析、流式...
摘要 淀粉样前体蛋白(APP)是阿尔茨海默氏病(AD)病因学中重要的分子,但其正常的生理功能尚不清楚.为了研究细胞内过量产生其各种片段对细胞生理机能的影响.将人APP695cDNA中编码C端105个氨基酸残基的DNA片段重组到真核表达载体pDORneo中形成重组质粒pDOR-neo-CT.然后用脂质体将其转染到人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中.用800μg/mlG418筛选获得了在mRNA和蛋白...
摘要 利用DNA重组技术,将Ⅲ型中国株HCVE2/NS1基因片段插入真核表达载体,然后转染哺乳动物细胞NIH3T3以表达E2糖蛋白.检测显示来自3月以上培养的细胞克隆中表达产物分子量为70kD,经Westernblot证实该表达产物能与抗HCV阳性血清进行特异性反应.以上表明首次在哺乳动物细胞中成功表达Ⅲ型中国株HCV的E2糖蛋白,并建立相应的稳定表达细胞系. ...
摘要 用电穿孔法将大鼠酪氨酸羟化酶(Tyrosinehydroxylase,TH)基因转染大鼠L-6TG成肌细胞株,经PCR检测、免疫组织化学和荧光组织化学检测证明,TH基因能在细胞内稳定整合和表达,并在辅因子存在时将酪氨酸转化为多巴.移植于大鼠纹状体后可成活并表达TH。
乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)是机体细胞毒性T淋巴细胞(CTL)识别的主要靶抗原,诱导的免疫应答在抑制病毒复制和清除病毒过程中具重要作用[1][2]。HBc表达效率高、自装配能力强,作为颗粒样载体能显著增强所呈现抗原免疫原性[3][4][5]。本实验在成功构建以HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因真核表达质粒pHBc-Mep的基础上[6],利用脂质体转染技术将其转入NS-1细胞,筛选、建立稳...

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