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通过腺病毒法建立稳定表达外源性人端粒酶反转录酶（hTERT）基因的牙周膜细胞系,以构建腺病毒介导的高效、稳定的hTERT牙周膜细胞系。方法 聚合酶链反应（PCR）法扩增hTERT基因编码序列,构建同源重组腺病毒质粒pAd-pshuttle-cmv-hTERT,收集腺病毒颗粒后感染人牙周膜细胞,实时荧光定量PCR检测hTERT及成骨相关基因碱性磷酸酶、核心结合因子2、骨涎蛋白、骨钙素、骨桥素、Ⅰ型胶...
重组人p53腺病毒注射液联合放疗治疗口腔鳞癌的近期疗效观察
口腔肿瘤 rAd-p53 放疗
2012/6/6
评价重组人p53腺病毒(rAd-p53)注射液联合手术、放射线治疗口腔鳞癌的疗效及安全性。方法 对自2005年1月至2008年4月,在解放军总医院手术后接受rAd-p53注射液结合放射线治疗的10例舌癌、12例牙龈癌患者及手术后仅接受单纯放疗的12例舌癌、14例牙龈癌患者进行回顾性调查，并对其疗效及不良反应进行定期复查或电话随访，分析rAd-p53注射液结合放射线治疗的疗效及安全性。结果 rAd-...
重组腺病毒p53转染口腔黏膜异常增生细胞的实验研究
癌前病变 腺病毒 基因治疗
2010/8/13
目的确定重组腺病毒p53（rAd-p53）对口腔黏膜异常增生角化细胞POE-9n转染的最佳滴度及其转染效率，为其在口腔癌前病变领域的进一步研究提供实验依据。方法采用携带绿色荧光蛋白（GFP）报告分子的重组腺病毒颗粒rAd-GFP确定口腔异常增生细胞对腺病毒转染的敏感性；以不同滴度的rAd-p53转染口腔异常增生细胞并通过MTT比色检测各组细胞的增殖抑制率；免疫细胞化学染色证实，rAd-p53转入细...
重组人p53腺病毒注射液治疗口腔黏膜白斑的生物学反应观察
腺病毒 基因治疗 口腔白斑
2010/8/13
目的观察重组人p53腺病毒注射液Ad-p53治疗上皮异常增生型口腔白斑引起的生物学反应。方法对18例上皮异常增生型口腔白斑患者进行为期15 d的Ad-p53局部黏膜内注射治疗。每3 d注射1次，以1 cm2作为一个注射点，每点注射1×108 vp，0.5 mL。在最后一次注射24~48 h内行病变组织活检，并用免疫组化法检测Ad-p53治疗前后组织内P53蛋白和P21CIP/WAF蛋白的表达。结果...
腺病毒介导的TRAIL基因对舌鳞状细胞癌细胞株的影响
鳞状细胞癌 腺病毒 凋亡基因 基因治疗
2010/8/20
目的探讨以凋亡基因TRAIL为靶基因，腺病毒（ Ad）为载体，巨细胞病毒启动子（ CMV）为启动子的重组基因治疗药物AdCMV- TRAIL诱导鳞状细胞癌细胞系TCa83凋亡的作用。方法用重组绿色荧光蛋白基因（ EGFP）的腺病毒AdCMV- EGFP为对照组，转染TCa83细胞确定重组腺病毒的转染率。在细胞转染1、3、5、7 d时，应用荧光倒置显微镜观察细胞形态，应用MTT检测细胞的存活率，流式...
腺病毒介导的骨形态发生蛋白2基因转染肌卫星细胞诱导成骨的动物实验研究
骨诱导 移植 肌卫星细胞 骨形态发生蛋白-2
2010/8/20
目的观察腺病毒介导的BMP- 2基因转染肌卫星细胞后体内骨诱导能力。方法采用动物实验方法，将转染BMP- 2基因的绿色荧光蛋（GFP）转基因鼠肌卫星细胞吸收到胶原支架上，然后将细胞胶原支架复合物移植入野生型129sv小鼠的后小腿肌肉中，应用X线片观察、组织学检查及荧光显微镜观察转染细胞的诱导成骨能力。结果用BMP- 2基因转染的肌卫星细胞复合胶原支架移植入野生型小鼠后小腿筋膜下肌肉后会产生异位骨形...
携带细胞周期调控基因p14~(ARF)的重组腺病毒的构建
细胞信号转导 重组腺病毒 基因治疗 喉癌
2010/8/19
目的构建携带参与细胞周期调控的p14ARF基因的重组腺病毒载体。方法将野生型p14ARF全长cDNA基因片段插入腺病毒载体质粒pAdTrack- CMV, 与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组, 经293细胞包装、扩增后得到携带p14ARF的重组腺病毒AdEasy- GFP- p14ARF。结果成功构建了AdEasy- GFP- p14ARF的重组腺病毒载体系统, 经测定腺病毒载体滴度...
表达人CD40配体的重组腺病毒载体的构建
hCD40L基因 腺病毒载体 DNA同源重组 基因治疗
2010/9/14
目的 构建含有hCD40L 基因的重组腺病毒载体,为其在动物模型体内表达和肿瘤基因治疗提供基础。方法 用Xho Ⅰ、Swa Ⅰ双酶切质粒pORF- hCD40L ,回收1 900 bp 基因片段并定向克隆插入穿梭质粒pShuttle 中Xho Ⅰ、EcoR Ⅴ双酶切位点,得到重组质粒pShuttle- hCD40L。经PmeI 酶切与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1 共转化BJ5183 细菌,同源...