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RNA分子的种类与亚细胞空间分布多样，同时分析单细胞内多种RNA对深入研究细胞异质性与疾病机制至关重要。荧光原位杂交成像技术可在单细胞水平观测RNA的类型、丰度与空间分布。然而，由于不同荧光基团之间存在光谱重叠，常规荧光显微成像一般只能同时检出4种目标分子。此外，RNA原位成像通常需要联合原位核酸扩增，以提高信号强度达到单分子检出水平。然而，此类方法大多需要外加扩增引物，其非特异性吸附与脱靶杂交容...