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本发明涉及一种利用FvePILS5基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体获得再生效率高的草莓新种质的方法及应用,包括:根据草莓FvePILS5的DNA序列,设计并合成包含目的基因靶点的sgRNA序列;用Bsa I酶将合成的包含目的基因靶点的sgRNA序列连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi?H载体;并利用农杆菌转化森林草莓叶片外植体,测序验证再生植株突变序列,得到愈伤形成和离体芽再生频率较...
中国林业科学研究院华北林业实验中心开发出精准性高的小型化Cas9基因编辑工具(图)
精准性高 小型化 Cas9基因 编辑工具
2023/11/20
CRISPR/Cas9是源自细菌获得性免疫系统的新一代基因编辑技术,在化学生物学、生物医学及基因治疗中具有潜在应用前景。CRISPR/Cas9技术使用引导RNA(single-guide RNA,sgRNA)识别靶标基因,并招募Cas9核酸酶对基因组进行切割、编辑等操作。然而,由于sgRNA识别基因组存在非特异性结合作用,现有CRISPR/Cas9技术应用于基因编辑时存在一定的脱靶效应,且缺乏对疾...
CRISPR-Cas9基因编辑技术自2012年问世至2020年获得诺贝尔化学奖,仅历时8年,这项技术为生命科学带来了革命性影响。目前,CRISPR-Cas9技术已广泛应用于生命科学研究的诸多领域,并且已用于地中海贫血症临床治疗试验,基因编辑技术将继续对生命科学研究、基因治疗、生物产业、伦理等产生广泛而深刻的影响。
蜱虫(Tick)是一种传播人兽共患病的重要媒介。作为严格的吸血性节肢动物,蜱几乎可以叮咬陆地上所有的动物,且吸血时间长、吸血量大、生活史复杂。这些特点使蜱携带了最广泛的病原体种类,包括病毒、细菌、真菌、寄生虫;传播40余种疾病,如莱姆病、森林脑炎、克里米亚-刚果出血热、发热伴减少综合征、立克次体病、无形体病、巴贝西虫病等,可导致死亡或慢性后遗症,严重影响生活质量。
中国科学院新疆生态与地理研究所荒漠与绿洲生态国家重点实验室张道远研究组创制了新疆野苹果组培体系,使得再生体系缩短至2~3个月,此方法可用于大批量扩繁新疆野苹果克隆苗。
中国科学院昆明动物研究所宿兵研究组发现CRISPR-Cas9基因编辑系统在灵长类中不会导致明显的脱靶效应(图)
中国科学院昆明动物研究所 宿兵 CRISPR-Cas9 基因编辑系统 灵长类 脱靶效应
2019/12/19
猕猴(Macaca mulatta)作为与人类进化关系最近的可进行遗传操作的非人灵长类,在大脑发育以及脑结构上都与人类具有高度的相似性。因此,在猕猴疾病模型上探索Cas9基因编辑的脱靶效应对未来的临床应用至关重要。为了系统评估CRISPR-Cas9在灵长类基因编辑中的脱靶效应,中国科学院昆明动物研究所宿兵课题组、郑萍课题组、昆明动物所灵长类中心以及中科院营养与健康研究所徐书华课题组合作,利用CRI...
中国科学院分子植物科学卓越创新中心/植物生理生态研究所张鹏研究组首次在甘薯中利用CRISPR/Cas9基因编辑技术改良淀粉的品质(图)
张鹏 甘薯 CRISPR/Cas9 基因编辑技术 淀粉 改良品质
2019/12/18
2019年9月23日,中国科学院分子植物科学卓越创新中心张鹏研究组在International Journal of Molecular Sciences杂志上在线发表了题为“CRISPR/Cas9-Based Mutagenesis of Starch Biosynthetic Genes in Sweet Potato (Ipomoea batatas) for the Improvement...
CRISPR/Cas9作为一项革命性的基因组编辑技术已广泛应用于多种生物的基因组编辑,该技术在具体应用中存在一些问题,例如在基因组中存在的“PAM-free”和“CRISPR-tolerant”等区域无法使用传统的CRISPR/Cas9技术进行编辑;基因组中每个位点的编辑都需要构建特定的gRNA;脱靶现象也是CRISPR/Cas9技术亟须解决的问题。为解决以上问题,中国科学院天津工业生物技术研究所...
近日,中国科学院天津工业生物技术研究所系统与合成生物技术研究团队开发了谷氨酸棒杆菌的CRISPR/Cas9基因组编辑工具。该研究通过重构Cas9和gRNA的表达盒,解决了Cas9毒性和gRNA自身转录终止子无法终止的问题,在谷氨酸棒杆菌中实现了基于CRISPR/Cas9的高效反向筛选;采用共转化Cas9和gRNA表达质粒避免了cas9基因的高频突变,成功实现质粒提供模板的高效基因编辑,敲除和插入效...
基因组编辑是生命科学新兴的颠覆性技术,特别是基于CRISPR-Cas9系统的基因组编辑工具近几年迅猛发展,在医疗、农业等领域得到广泛应用。然而,Cas9脱靶现象是目前限制其发挥巨大潜力的最主要问题之一,提高该系统的特异性一直是基因组编辑方法研究的焦点。通过蛋白质工程的方法,美国两个课题组前期分别对Cas9蛋白进行定向改造,获得了三种特异性显著提高的Cas9蛋白变体:eSpCas9(1.0)、eSp...
生菜CRISPR/Cas9基因编辑体系的建立
生菜 农杆菌介导遗传转化 基因编辑 CRISPR/Cas9
2018/12/26
CRISPR/Cas9基因编辑技术已经成功应用于多种植物基因组的编辑, 但是在生菜中鲜有报道。本研究拟在生菜(Lactuca sativa L.)中建立CRISPR/Cas9基因编辑体系。首先根据生菜FANCM基因序列设计靶位点, 构建Lsfancm-CRISPR/Cas9载体。然后以生菜子叶作为外植体, 通过农杆菌侵染、共培养、愈伤组织诱导、芽再生及生根培养等过程, 对生菜进行农杆菌介导的遗传转...