搜索结果: 1-15 共查到“知识库 生物学 端粒酶”相关记录17条 . 查询时间(0.044 秒)
端粒酶活性与肿瘤放射治疗的关系
端粒酶 肿瘤 放射治疗
2009/11/18
随着端粒酶活性与肿瘤病理学关系的明确,对端粒酶与肿瘤关系的研究成为生物学研究领域的热点问题之一。 对端粒酶活性与肿瘤的关系,以及各种射线,特别是重离子辐照肿瘤后端粒酶活性的变化等最新研究成果进行了综述。 同时指出由于研究结论的矛盾,试图通过抑制端粒酶活性以杀死肿瘤,最终实现癌症治疗的方案是否可行,端粒酶活性的检测是否能作为放射肿瘤治疗效果有效性的指标还需要更深入的探讨。
根据端粒酶含有蛋白质组分和RNA组分的特点,采用寡核苷酸亲和纯化法从HeLa细胞蛋白粗提物中分离纯化人类端粒酶,纯化产物以TRAP法检测其延伸端粒活性,并采用RNA印迹法进行鉴定,然后从纯化产物中分离蛋白质组分,以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其蛋白质亚基成分,可见到4种蛋白质亚基成分,与蛋白质分子质量标准比较,有两条位置接近212.2 ku,一条接近116.0 ku,一条接近42.7 ku.结果...
随着对端粒和端粒酶在衰老和肿瘤中重要性认识的不断深入,端粒酶的激活途径已日益成为这一研究领域的热点.已发现,MYC原癌蛋白(myelocytomatosis virus oncoprotein, MYC)在端粒酶的激活中起关键作用.它可以与TERT基因启动子区域内的E盒结合反式直接激活端粒酶,还可能介导了细胞内其他分子如人乳头瘤病毒E6癌蛋白(human papillomavirus E6...
Telomerase, a ribonucleoprotein enzyme, has been found in immortalized but not in most somatic adult human tissues, and thus emerged as a novel target for cancer chemotherapy. Recently it has been fou...
高等植物端粒和端粒酶的研究进展
端粒 端粒酶
2007/12/30
摘要端粒是构成真核生物线状染色体末端重要的DNA-蛋白质复合结构,DNA由简单的串联重复序列组成。它的合成由一个特殊的具有反转录活性的核糖核蛋白-端粒酶完成。端粒对染色体、整个生物基因组,甚至对细胞的稳定都具有重要意义。本文就植物端粒、端粒酶、端粒结合蛋白,以及端粒变化、端粒酶在植物生长发育中的调节作一概述。
端粒酶反转录功能区基因的表达和纯化
端粒酶 反转录功能区基因 pET载体 亲和层析
2007/12/29
通过PCR技术扩增出hTRT的目的片段,克隆至表达载体pET28-b中并转化至BL21(DE3),经IPTG诱导后在52 kDa处发现有外源基因的表达,密度扫描显示表达蛋白含量为20%。目标蛋白以包含体形式存在,含8mol/L尿素和10mmol/L DTT的裂解缓冲液溶解的包含体采用金属螯合层析有效分离出目标蛋白。免疫印迹实验表明:诱导出的融合蛋白是端粒酶反转录功能区基因所编码的蛋白质。
摘要 为分离纯化人类端粒酶复合体并对其蛋白质组分进行分析 ,自行设计一套特异的以端粒重复序列为配体 ,以亲和磁珠为介质 ,以竞争性碱基序列为洗脱原则的寡核苷酸亲和纯化法 ,对He La细胞端粒酶复合体进行分离纯化 .并采用近年发展起来的主要用于检测序列特异性 DNA结合蛋白的凝胶迁移阻滞分析法对纯化产物进行鉴定分析 .应用 SDS- PAGE对纯化蛋白质亚基组分进行分析与鉴定 ,并采用电泳迁移率和...
端粒酶反义cDNA对乳腺癌细胞损伤修复能力的影响
端粒酶 反义核酸技术 MCF-7 损伤修复
2007/12/20
摘要 利用反义核酸技术将端粒酶RNA的全长cDNA反向导入乳腺癌MCF 7细胞基因组中 .通过单细胞凝胶电泳实验发现 ,其DNA受H2 O2 损伤后的修复能力下降 .但端粒酶活性抑制为何引起其DNA损伤修复能力下降的原因尚待进一步研究 .
端粒酶反义cDNA对乳腺癌细胞恶性表型的影响
端粒酶 反义核酸技术 MCF-7 恶性表型
2007/12/20
摘要 为了进一步探讨端粒酶在肿瘤发生中的作用 ,实验应用反义核酸技术研究端粒酶反义cDNA对乳腺癌细胞MCF 7恶性表型的影响 采用的方法包括 :基因重组、脂质体共转染法获得端粒酶反义重组病毒 ,病毒感染MCF 7后 ,检测细胞的生长曲线、细胞周期及集落形成能力 结果表明 ,与对照组细胞相比 ,反义病毒感染后的MCF 7细胞恶性表型明显降低 提示端粒酶RNA的反义cDNA的导入 ,可以显著抑...
HeLa细胞端粒酶最适反应条件及活性重建
telomerase micrococcal nuclease optimal catalytic condition reconstitution
2007/12/20
Telomerase is a ribonucleoprotein that catalyzes telomere elongation through the addition of TTAGGG repeats in humans. Activation of telomerase is often associated with immortalization of human cells ...
端粒酶RNA的反义cDNA对乳腺癌细胞凋亡的影响(英文)
人端粒酶RNA 反义核酸技术 凋亡
2007/12/18
摘要 为了进一步探讨端粒酶RNA(hTR)的反义cDNA对乳腺癌MCF 7细胞凋亡可诱导性的影响 ,构建了能将外源基因整合至细胞基因组的整合型腺病毒载体vAd AAV ,并将hTR全长cDNA反向连接至此载体上 ,获得反义重组腺病毒vAdT AAV .vAd AAV和vAdT AAV分别感染MCF 7细胞后 ,获得两个细胞株MCF 7 vAd AAV和MCF 7 vAdT AAV ,其中MCF 7...
多形胶质母细胞瘤细胞系端粒酶活性的测定
胶质母细胞瘤 端粒酶 TRAP分析
2007/12/18
摘要 端粒缩短见于星形细胞瘤发展过程中,但其长度在胶质母细胞瘤/细胞系相对稳定,提示胶质瘤细胞内存在端粒修复机制的可能性.为证实此点,利用端粒重复片段扩增技术(TRAP),对8株人/大鼠多形胶质母细胞系的蛋白提取液中端粒酶活性加以测定.结果显示:8例胶质瘤样本的反应液均可见端粒PCR扩增片段;用无DNase的RNase事先处理蛋白提取液,可明显降低或消除PCR产物的出现,说明TRAP反应中的PCR...
中国人端粒酶催化亚基(hTERT)基因 第六内含子VNTR多态性研究
端粒酶 端粒酶催化亚基 基因多态性 VNTR
2007/12/7
摘要端粒酶的激活在肿瘤发生、衰老以及细胞永生化过程中起重要作用,端粒酶催化亚基(hTERT)的表达是诱导端粒酶活性的限制性步骤,hTERT的表达受到复杂的调控。hTERT基因组全长40 kb,包含16个外显子及15个内含子,其中,在第2和第6内含子中各存在2个可变数目串联重复(VNTR)多态性序列(VNTR2-1st、VNTR2-2nd以及VNTR6-1st和VNTR6-2nd),在第12内含子存...
人端粒酶逆转录酶功能区表位的筛选与鉴定
2007/7/25
端粒酶是真核生物染色体末端的核蛋白结构,是一种RNA依赖的DNA聚合酶。人端粒酶是由端粒酶RNA、人端粒酶逆转录酶(hTERT)、端粒酶结合蛋白、热休克蛋白90、分子伴侣p23、dyskerin等组成[1],其中hTERT严格调控端粒酶的表达,为端粒酶激活的限速决定因子,在肿瘤发生中起关键作用[2]。因hTERT特异地表达于多数肿瘤细胞而在正常体细胞中不表达而使其成为研制抗肿瘤药物的理想靶点[3]...
人端粒酶RNA反义寡核苷酸对顺铂诱导K562细胞凋亡的影响
2007/7/25
端粒酶是一种特殊核糖核蛋白逆转录酶,在绝大多数恶性肿瘤细胞中高表达[1],通过延长端粒而维持肿瘤细胞的持续增殖能力,抑制端粒酶的活性有可能抑制肿瘤细胞的活性。端粒酶已成为肿瘤基因治疗的新靶点[2]。本研究针对人端粒酶RNA(hTR)模板区设计合成反义寡核苷酸(ASODN),并观察其对K562细胞端粒酶活性的改变能否影响顺铂诱导K562细胞凋亡,以了解hTR反义核酸是否增加K562细胞对顺铂的敏感性...