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搜索结果: 1-15 共查到基础医学 抗原性相关记录16条 . 查询时间(0.113 秒)
近日,上海市公共卫生临床中心、复旦大学生物医学研究院徐建青教授课题组和同济大学生命科学与技术学院曹志伟教授课题组合作研发了一个新的病原体抗原性计算平台。5月2日,研究成果以《CE-BLAST: 一种计算新发传染病病原体抗原性相似度的新型平台》(“CE-BLAST makes it possible to compute antigenic similarity for newly emerging...
克隆、表达恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)疫苗候选分子-裂殖子表膜蛋白MSPDBL2 (PF10_0355)的DBL2结构域,并分析其抗原性。 方法 PCR扩增实验室培养的恶性疟原虫标准株3D7的基因组DNA,采用无缝克隆技术快速连接目的片段和质粒载体,构建重组表达质粒pET28a-DBL2,转化至大肠埃希菌BL2l(DE3)中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱...
克隆、表达白纹伊蚊唾液腺重组aegyptin相似蛋白alALP编码基因并分析其抗原性。 方法 运用生物信息学方法分析alALP与aegyptin氨基酸序列(GenBank登录号为ABF18122.1)的同源性、二级结构和抗原肽段。提取白纹伊蚊唾液腺总RNA,根据alALP的基因编码序列(GenBank登录号为AY826121)设计引物,RT-PCR扩增目的基因,亚克隆至pGEX-6P-1质粒,...
克隆、表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)磷酸甘油酸变位酶2(TgPGAM2)基因片段,并分析其抗原性。 方法 提取弓形虫RH株速殖子总RNA,逆转录合成cDNA。PCR扩增TgPGAM2基因。扩增产物经双酶切后连接入pET30a(+)载体,重组质粒转化大肠埃希菌(E. coli)DH5α,阳性菌落经PCR和双酶切鉴定,并测序。将测序正确的重组质粒pET30a(+)-TgPGAM...
克隆、表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii) RH株棒状体蛋白17(TgROP17)基因,并分析其抗原性。 方法 制备弓形虫RH株速殖子总RNA,根据TgROP17基因全长编码序列(GenBank登录号为AM075203.1)的开放阅读框设计引物并进行逆转录PCR(RT-PCR)扩增,扩增产物经双酶切后连接入pGEX-6P-1载体,重组质粒转化大肠埃希菌(E. coli)DH5α,...
精确分析登革病毒(dengue virus,DENV)非结构蛋白1(non-structural protein 1, NS1)氨基(N)端抗原性和免疫原性,探讨NS1 N端多肽用于分型检测DENV感染可行性。方法 合成4型DENV 标准株NS1蛋白 N端1-15氨基酸残基序列多肽(D-1 P1、D-2 P1、D-3 P1和D-4 P1),采用ELISA方法检测多肽同DENV NS1 血清型...
变形链球菌(Streptococcus mutans)是引起人类龋齿的主要致病菌,其表面蛋白(PAc)是龋齿疫苗研究的主要对象.在该研究中,变形链球菌pac基因的功能A区和P区经PCR扩增后,以连接链Gly4SerGly4连接,并克隆至pET32a质粒中构建成pET32a-A-P重组表达载体,经IPTG诱导表达后,表达产物A-P重组蛋白(rA-P蛋白)经饱和硫酸铵沉淀、镍亲和层析、疏水层析...
目的: 构建含人H pylori 5种候选疫苗抗原Lpp20, HspA, UreaseA, CagA, UreaseB的编码基因的重组质粒并研究其抗原性. 方法: 应用PCR技术从H pylori染色体中扩增编码Lpp20, HspA, UreaseA, CagA, UreaseB的基因片段, 将其T-A克隆和测序, 并与GenBank公布的其他H pylori菌株基因序列比较, 再将目的基因克...
目的: 构建含人幽门螺杆菌(H pylori)热休克蛋白A编码基因的重组载体、进行核甘酸序列分析,并在E. coli BL21中表达,研究其抗原性,为疫苗的开发奠定基础.方法: 利用分子克隆技术从H pylori DNA染色体中,扩增热休克蛋白A编码基因片段; 将目的基因与载体pET32a(+)同时经kpnⅠ、BamH I 双酶切、纯化、连接后,转化含有目的基因的重组载体; 以含目的基因片段的重组...
目的 构建原核重组表达质粒pET23aSAG2,并在大肠埃希菌中实现高效表达,以及检测表达产物的抗原性。 方法 PCR扩增SAG2编码基因目的片段,琼脂糖凝胶电泳回收纯化,克隆至pMD18T载体,转化大肠埃希菌DH5α。测序后亚克隆至表达质粒载体pET23a,构建重组表达质粒pET2 3aSAG2,转化大肠埃希菌DH5α。筛选阳性克隆,经限制性酶切分析鉴定后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以异...
目的 重组表达制备日本血吸虫虫卵中毛蚴抗原(SjMP10)。 方法 根据日本血吸虫虫卵中毛蚴抗原SjMP10分子的读框序列设计合成1对引物,扩增SjMP10 DNA片段并克隆到表达载体pGEX-4T-3中。转化BL21(DE3)后,诱导表达谷胱甘肽转移酶-虫卵中毛蚴抗原10(GST-SjMP10)融合蛋白。采用洗脱法制备GST-SjMP10融合蛋白,应用免疫印迹法(Western blott...
目的 探索体外培养日本血吸虫尾蚴细胞的增殖与传代技术。 方法 无菌收集日本血吸虫活尾蚴5 000~10 000条,置于含有10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中,用组织刀快速割切尾蚴使成组织碎裂物,加入250 U蟹胶原酶在26℃下孵育30 min,然后离心去酶,加入含有青霉素(100 U/ml)、链霉素(O.1 mg/ml)、两性霉素B(0.25μg/ml)和适量促细胞生长物的RPMI 164...
目的 在毕赤酵母菌(Pichia pastoris)表达系统中表达日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3),并与原核表达rSj14-3-3比较其抗原性。 方法 以重组质粒pET28a-rSj14-3-3为模板,PCR扩增Sj14-3-3基因,将特异片段连接到pMD18-T载体, DNA序列分析后,亚克隆目的片段Sj14-3-3至酵母菌分泌表达载体pPICZαB。测序正确后,重组质粒...
目的 对旋毛虫新生幼虫p46000抗原基因进行原核表达并检测重组抗原抗原性。 方法 利用聚合酶链反应 (PCR)扩增目的基因 ,克隆到原核表达载体 pET-28a ,构建重组表达质粒 ,经酶切及测序鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3 ),以异丙基-β-D 硫代半乳糖苷诱导表达。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)、酶联免疫吸附测定 (ELISA)和蛋白质印迹法 (Weste...
摘要 依据丙型肝炎病毒(HCV)多蛋白核心区N端氨基酸序列和密码子简并性,人为设计并采用半化学半酶促的方法合成了一个DNA片段。经核酸杂交检测以及DNA序列分析证实,该片段的核苷酸序列与设计完全一致。将合成的DNA片段插入融合表达载体pGEX-2T中,表达产物经亲和层析纯化后进行Western免疫印迹实验和间接ELISA分析,结果表明,融合蛋白具有HCV核心区抗原的免疫反应性,可望用于HCV抗体的...

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