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搜索结果: 1-15 共查到荧光素酶相关记录22条 . 查询时间(0.216 秒)
旨在鉴定牦牛Smad 4基因与bta-miR-146a的靶向关系,为探究它们在牦牛卵巢卵泡发育过程中的可能分子调控机制提供理论基础。利用miRBase数据库和MEGA 6.0软件分析miR-146a在不同物种中的保守性,同时利用TargetScan软件预测其潜在靶基因,通过构建psiCHECK2双荧光素酶报告基因载体进行靶向验证。生物信息学分析结果显示,miR-146a成熟序列在脊椎动物中具有高度...
旨在鉴定牦牛Smad 4基因与bta-miR-146a的靶向关系,为探究它们在牦牛卵巢卵泡发育过程中的可能分子调控机制提供理论基础。利用miRBase数据库和MEGA 6.0软件分析miR-146a在不同物种中的保守性,同时利用TargetScan软件预测其潜在靶基因,通过构建psiCHECK2双荧光素酶报告基因载体进行靶向验证。生物信息学分析结果显示,miR-146a成熟序列在脊椎动物中具有高度...
目的:构建一种可用于评价人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells, hASCs)成骨向分化的荧光素酶报告系统,以期能够快捷、特异且定量的检测出细胞在体外的成骨向分化情况,并且使将来活体监测小型实验动物外源移植细胞的成骨分化成为可能。方法:将骨钙素(osteocalsin, OC)基因的启动子克隆到荧光素酶luciferase报告基因的上游,构建pLVX-...
为研究复制子DNA疫苗在生物活体内的表达情况, 构建含有荧光素酶报告基因的复制子表达质粒pSVK-luc。方法PCR扩增荧光素酶报告基因, 克隆入DNA复制子载体pSVK, 酶切鉴定和测序分析筛选阳性重组质粒pSVK-luc; 化学法转染人胚肾293T细胞, 流式细胞术和免疫荧光法检测荧光素酶基因在293T细胞中的表达; 利用基因电穿孔导入仪递送重组质粒至BALB/c小鼠股四头肌, 活体成像仪动态...
旨在了解分化群α基因可能的调控序列及其转录调控机制。本研究利用基因组步移技术扩增鸭CD8α基因的启动子区序列,使用在线软件进行序列分析;分别将鸭肝炎易感组和抗性组的CD8α基因启动子区定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3Basic 中,利用酶切与测序技术进行鉴定;并瞬时转染细胞,采用荧光素酶报告基因系统检测启动子载体的活性。结果,扩增出一条长度为2 480 bp的片段(包含第一外显子56 bp,...
在实验动物存活条件下,通过活体成像技术能探测到标记有萤火虫荧光素酶(luc)基因的肿瘤细胞在体内的分布情况。本研究旨在稳定表达nm23-H1 shRNA的人肺腺癌细胞株A549中,建立能稳定表达萤火虫荧光素酶的发光细胞株A549/nm23-H1-shRNA-luc,并检测其体内外发光情况,为下一步相关的体内实验提供实验材料。方法 通过浓度梯度法测定A549/nm23-H1-shRNA细胞的潮霉素最...
为研究垂体特异性转录因子(Pituitary transcription factor 1, Pit1)启动子转录调控机制,将获得的Pit1基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,构建Pit1基因启动子调控的报告基因重组表达质粒。本研究利用染色体步移技术扩增鹅Pit1基因的启动子,定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3Basic 中,构建含有正确目的基因的报告基因重组体pGL3Pit1,并通过...
研究携带荧光素酶的增殖缺陷型腺病毒(Ad-luciferase,Ad-Luci)经不同途径注射后小鼠体内荧光素酶的表达和分布,为肿瘤的腺病毒载体基因治疗提供参考。 方法: 建立人胰腺癌PANC-1细胞裸鼠移植瘤模型,Ad-Luci病毒单次或多次瘤体内注射,或者肌内、尾静脉和腹腔注射Ad-Luci病毒至正常小鼠,采用IVIS Lumina活体成像系统观察荧光素酶在小鼠体内的分布和表达,并观察Ad-L...
利用化工污染物能抑制荧光素酶催化发光反应这一特性,对水质中6种化工化合物分别进行毒性测试,建立一种快速检测水质中化工污染物毒性的生物学方法。实验结果表明,对苯二酚、4-氨基酚、苯胺、氯仿、盐酸邻联甲苯胺和硫柳汞的EC50值分别为:5.563、10.225、20.236、38.432、8.827和0.6 mg/L,6种污染物毒性大小依次为:硫柳汞>对苯二酚>盐酸邻联甲苯胺>4-氨基酚>苯胺>氯仿,相...
克隆人BRCA1基因的启动子,构建荧光素酶报告基因载体,并在细胞内检其活性,为其后续基因凋控研究提供依据。方法:采用PCR技术,从人正常宫颈组织细胞中扩增出BRCA1启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,测序所扩增的DNA序列,将其转染入HCT 116细胞中并检测其活性。结果:酶切及基因测序方法证实所构建质粒含有pGL3-basic全序列及BRCA1启动子上游调控序列,扩增的BR...
克隆人黏蛋白/黏液素5AC(MUC5AC)基因启动子并构建该启动子的荧光素酶报告系统,探讨该启动子的活性及转录靶向性。方法:运用Vector NT1软件包对MUC5AC基因5′端1 348 bp进行启动子特征分析;以人A549细胞基因组DNA为模板分离出人MUC5AC基因5′端非翻译区大小为1 348 bp的片段并进行测序鉴定,再以扩增产物为模板对启动子进行5′端删除分析,分别扩增737 bp(-...
目的: 构建含荧光素酶(luciferase,luc)基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒,并观察其在肝癌细胞Bel-7402中抑制外源荧光素酶的表达.方法: 设计的两条反向重复的多聚核苷酸序列,退火形成双链DNA,再与双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA-luc重组质粒,与荧光素酶基因表达质粒pCMV-luc共转染肝癌细胞株BEL-7402,检...
从一种来自中国日行性萤火虫(云南窗萤)发光器官mRNA中克隆、测序并表达了有功能的荧光素酶。云南窗萤荧光素酶的cDNA序列有1 647个碱基,编码548个氨基酸残基。从推测得到的氨基酸序列的比对分析得出:云南窗萤的荧光素酶与来自Lampyris noctiluca, L. turkestanicus和Nyctophila cf. caucasica三种萤火虫的荧光素酶有97.8%的序列一致性。从推...
研究在室温、低温冷藏以及反复冻融等条件下, 海藻糖对虫荧光素酶( luciferase) 活性的保护作用。结果表明, 海藻糖对虫荧光素 酶活性有明显的保护作用。反复冻融时, 海藻糖的保护作用尤为显著。反复冻融3 次时, 含海藻糖的酶制剂的保活率为51 .8% , 不含海 藻糖的酶制剂的保活率为19 .1 % , 含糖组保活率是无糖组平均保活率的2 .71 倍。海藻糖对虫荧光素酶的最适保活浓度约...
背景与目的:构建NGAL 基因5’侧翼区转录调控元件萤火虫荧光素酶报告基因表达载体。材料与方法:以PCR法从SHEEC食管癌细胞基因组DNA中扩增NGAL基因5’侧翼转录调控区不同长度片段G0~G6(-1431~+84)。 PCR产物经pGEM-T easy转载,再定向亚克隆插入pGL3-Basic。重组子通过特异限制性内切酶切割,琼脂糖电泳予以鉴定。结果:成功构建NGAL 基因5’侧翼区转录调控...

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