搜索结果: 1-15 共查到“园艺学 原核表达”相关记录19条 . 查询时间(0.222 秒)
从栽培番茄（Solanum lycopersicum）‘M82’中克隆到1个WRKY家族基因SlWRKY16。研究结果显示：SlWRKY16包含1 497 bp的完整开放读码框，编码498个氨基酸，理论分子量为55.5 kD，含有1个WRKYGQK保守结构域和C2H2锌指结构域，属于Ⅱb类WRKY转录因子基因，且定位于细胞膜上；栽培番茄SlWRKY16与潘那利番茄SpWRKY6（XP_015064...
以感病紫茉莉叶片为材料，采用RT-PCR方法克隆落葵皱缩花叶病毒（Basella rugose mosaic virus，BaRMV）的外壳蛋白（coat protein，CP）基因，并构建pET30a-BaRMV-cp原核表达载体。将原核表达载体转化大肠杆菌[Rosetta(DE3)PlysS]，成功诱导表达得到大小约为40.0 kD的与预期大小相符的融合蛋白（His-CP）。SDS-PAGE电...
茶尺蠖信息素结合蛋白PBP2的基因克隆、原核表达及其结合功能
茶尺蠖 信息素结合蛋白 原核表达 性信息素与茶树挥发物质 结合特征
2017/11/24
茶尺蠖(Ectropis obliqua)是中国茶区主要的鳞翅目害虫，其幼虫暴食性常给茶园带来巨大损失。鳞翅目昆虫雌雄个体间普遍存在着性信息素通讯环节，而茶尺蠖性信息素识别途径一直鲜有报道。论文旨在通过对茶尺蠖性信息素识别过程中的结合蛋白基因进行鉴定和功能研究，为茶尺蠖性信息素化学通讯和嗅觉信息识别传递机制提供理论依据。【方法】利用RT-PCR技术对从雄虫触角转录组数据中首次鉴定和发现的一个茶尺蠖...
采用两种策略增强了马铃薯卷叶病毒（PLRV）CP 基因的水溶性原核表达。首先，用5 种可表达出分子伴侣的质粒分别转化重组菌TOP10（pBAD-LRCP），获得了既含pBAD-LRCP 又含分子伴侣质粒的转化子；诱导转化子中PLRV-CP基因与分子伴侣基因同时表达，SDS-PAGE 结果表明，从转化子提取的水溶性蛋白中有明显的PLRV 重组CP 条带，即分子伴侣增进了重组CP 的水溶性表达。其次，...
制备香蕉线条病毒广东分离物（BSV-GD）的抗血清，可为BSV-GD 的快速检测和进一步研究BSV 编码蛋白的功能提供条件。通过常规分子生物学方法，克隆了BSV-GD 衣壳蛋白（Coat protein，CP）功能域基因，构建了该基因的原核表达载体pET28b-CP，并诱导表达了大小约为46.5 kD 的融合蛋白His-CP。可溶性分析表明该融合蛋白以包涵体形式存在。利用His 标签纯化试剂盒对目...
ARC1 是植物特有的一类含有U-box/ARM 结构域的蛋白，在芸薹属植物自交不亲和（self-incompatibility，SI）信号转导中起着正向调控因子的作用。将羽衣甘蓝（Brassica oleracea var.acephala）BoARC1 编码区的序列连接到原核表达载体pET-14b 上，通过酶切鉴定和测序分析，构建pET-14b-BoARC1 表达质粒；将获得的阳性表达质粒转化...
筇竹CBF1基因的原核表达和多克隆抗体的制备
筇竹 CBF1 原核表达 抗血清制备
2014/2/26
以筇竹（Qiongzhuea tumidinoda Hsueh et Yi）叶片为试材，采用RT-PCR方法克隆其CBF1基因，并将CBF1连接到原核表达载体pET32a（+）上，经克隆测序确定所构建的重组载体pET32-QZ开放阅读框正确。将重组载体pET32-QZ转化大肠杆菌Rosetta2（DE3）菌株，经IPTG诱导表达，SDS-PAGE凝胶电泳，考马斯亮蓝染色，证明CBF1蛋白得到了高效...
利用番木瓜环斑病毒（PRSV）HC-Pro 基因3′端824 bp 区段，通过OZ-LIC 法构建了含有PDK 内含子的发夹RNA 编码结构，并选用pSP73 和M-Jm109LacY 分别作为宿主载体和宿主菌，构建了高效的同源dsRNA 原核表达工程菌M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-H824，经IPTG 诱导表达的dsRNA 不被DNase I 和RNase A 降解，稳定性较好。...
从罗汉果（Siraitia grosvenorii）转录组中获得一条与罗汉果甜苷Ⅴ生物合成相关的葡萄糖基转移酶（UDPG）的unigene片段，以罗汉果授粉后70 d的果实RNA为模板，利用RACE和RT-PCR技术克隆UDPG全长基因，将克隆得到的SgUDPG1基因连接到原核表达载体pEASY-E1上，构建融合表达载体，转化到大肠杆菌BL21（DE3），通过IPTG诱导表达，重组蛋白纯化，SDS...
番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因原核表达蛋白的抗血清制备及其检测应用
番木瓜 番木瓜环斑病毒 外壳蛋白基因（cp）
2012/10/16
以受番木瓜环斑病毒（Papaya ring spot virus，PRSV）侵染的番木瓜（Carica papaya）叶片为供试材料，采用RT-PCR 方法克隆其外壳蛋白基因cp，并将其连接到原核表达载体pET-28b（+）上，酶切鉴定及克隆测序确定开放阅读框的正确性，将获得的重组质粒转化大肠杆菌表达宿主菌。通过摸索转化的表达宿主菌种类、IPTG 浓度及诱导时间，获得高效表达PRSV cp 的条件...
葡萄果实β–葡萄糖苷酶基因克隆、原核表达及活性检测
葡萄 果实 &beta &ndash
2012/10/17
以‘玫瑰香’葡萄着色期的果肉为试材，通过反转录技术克隆了ABA合成相关酶β–葡萄糖苷酶基因VvBG1的1 518 bp编码区核苷酸序列，其编码1个含有505氨基酸的多肽。生物信息学分析表明，VvBG1含有1个跨膜区和糖基水解酶1超家族保守域。通过BamHⅠ和XhoⅠ限制性内切酶将除去信号的编码区克隆到原核表达载体pET28a（+）中，并转化大肠杆菌表达菌株BL21（DE3），成功诱导并纯化了VvB...
弓形虫RH株表面抗原SAG3去信号肽基因的蛋白原核表达及鉴定
刚地弓形虫 SAG3基因 原核表达
2012/2/14
根据GenBank 中弓形虫表面抗原SAG3 基因序列,以弓形虫总RNA 反转录的cDNA为 模板 ,扩增出SAG3 去除信号肽基因并进行原核表达。将重组pET28a(+)SAG3阳性表达质粒转 入 大肠杆菌BL(DE3)中,用IPTG 进行诱导表达。通过SDS-PAGE 和Western blotting 对重组蛋 白进行分析和鉴定。结果表明:成功扩增了不含信号肽的SAG3基因,构建的原核表...
齿兰环斑病毒CP基因的原核表达及其产物抗血清制备
齿兰环斑病毒 CP基因 原核表达 抗血清制备
2011/9/1
本研究在于探讨侵染兰花的重要病毒之一齿兰环斑病毒（Odontoglossum ringspot virus，ORSV）的检测技术。从福建省漳州市采集感染齿兰环斑病毒的建兰病样，设计一对特异性引物扩增并克隆得到该病毒的外壳蛋白基因，该基因开放阅读框长477 bp，编码158 aa约合18.0 kDa的蛋白质，随后将目的基因插入pET-29a（+）中构建相应的原核表达载体进行诱导表达，目的蛋白经纯化后...
【目的】克隆甘蓝型油菜（Brassica napus）油体钙蛋白（caleosin）基因BnClo1,并进行原核表达研究。【方法】在获得甘蓝型油菜BnClo1基因全长cDNA的基础上,根据BnClo1基因编码区设计1对特异引物,以甘蓝型油菜种子总RNA为模板,通过RT-PCR获得了约750 bp的cDNA片段,T/A克隆后进行序列测定。随后将该蛋白成熟肽cDNA片段克隆到原核表达载体pTYB12中...