搜索结果: 1-15 共查到“真核表达质粒”相关记录42条 . 查询时间(0.402 秒)
TP53诱导的糖酵解和凋亡调节因子（TP53-induced glycolysis and apoptosis regulator,TIGAR）是p53下游的靶基因,具有调节糖酵解水平和去除活性氧（Reactive oxygen species,ROS）并降低由活性氧诱发的细胞凋亡水平。【目的】 构建鸡源TIGAR基因的真核表达质粒,并检测TIGAR基因在DF1细胞中的抗凋亡作用,为建立稳定表达鸡...
小G蛋白家族成员Rap2a可调控内皮素和细胞粘附从而影响细胞运动及细胞与基质间相互作用，但其在肿瘤发生发展中的作用仍属未知。克隆人Ras家族小G蛋白Rap2a的cDNA，构建其真核表达质粒并在肺癌细胞表达，初步探讨Rap2a在肺癌发生发展中的作用。方法 Western blot检测Rap2a在肺癌细胞中的内源性表达。人骨肉瘤细胞株U2OS提取细胞总RNA，经逆转录聚合酶链式反应逆转录成cDNA，P...
旨在预测羊口疮病毒(ORFV)ORF125蛋白结构及其在真核表达质粒转染细胞中的定位。设计引物PCR扩增ORF125基因，并将其定向克隆至pEGFP-N1真核表达载体，经酶切鉴定及序列测定后得到阳性重组表达质粒pEGFP-ORF125。利用DNAStar和MEGA4.0元件分析不同毒株间ORF125基因的遗传进化关系，接着通过在线Expasy工具预测其二级结构并与Bcl-2家族成员进行比较。利用脂...
构建靶向化学趋化因子受体1（CXCR1）的短发夹小干扰RNA（shRNA）质粒表达载体。方法：针对人CXCR1基因的mRNA序列，按RNA干扰靶位点的设计原则，设计并构建靶向CXCR1基因的3个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体，经酶切和测序确认构建成功后，转染胃癌细胞MKN45，RT-PCR和Western blot检测CXCR1 mRNA和蛋白的表达。结果：经酶切和测序证实，3个...
STAT3真核表达质粒的构建及对胃癌细胞增殖的影响
胃肿瘤 信号转导和转录激活因子3 细胞增殖能力
2013/11/12
构建人信号转导和转录激活因子3（STAT3）真核表达载体，研究STAT3基因对人胃癌细胞株MGC803的影响。方法 构建pcDNA3-STAT3真核表达质粒，经脂质体介导转染胃癌细胞株MGC803。RT-PCR和Western blotting检测转染后STAT3、P-STAT3(Y705)、P-STAT3(S727)、Survivin 和 PCNA在MGC803细胞中mRNA和蛋白水平的表达...
Smad2/3/4真核表达质粒的构建及重组蛋白表达
Smad 蛋白免疫印记 融合蛋白
2012/4/25
构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒，证实融合蛋白在细胞内表达。方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板，设计特异性引物，PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因，亚克隆至含有pcDNA3.1myc-HisA 标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人胚胎肾细胞HEK293 中，提取细胞蛋白进行 Western blot...
刚地弓形虫HSP70真核表达质粒构建及评价
热休克蛋白70(HSP70) 基因重组 真核表达
2014/8/6
构建刚地弓形虫热休克蛋白70(TgHSP70)真核表达重组质粒p3×Flag-CMW-14-TgHSP70,并在HEK 293T细胞内获得表达,为制备基因疫苗奠定基础。方法 扩增TgHSP70基因,双酶切后与真核表达质粒p3×Flag-CMW-14连接,经酶切、PCR及测序鉴定;脂质体法将重组体转染HEK 293T细胞中,TgHSP70的表达产物通过RT-PCR和western blot在基因和蛋...
参照GenBank上登录的副溶血弧菌鞭毛蛋白flaC基因序列设计引物，PCR扩增溶藻弧菌HY9901株的flaC全长基因，序列分析结果显示该基因为1 155 bp，编码384个氨基酸.与GenBank中其他弧菌的同源基因序列比对显示，溶藻弧菌flaC基因与副溶血弧菌flaC基因的同源性最高(87%).将该基因定向克隆到真核表达质粒pcDNA3.1(+)中，获得带溶藻弧菌鞭毛蛋白flaC基因的真核表...
bcl-xL短发夹状RNA重组真核表达质粒对几种细胞增殖的影响
RNA干涉 基因转染 基 bcl-xL
2009/8/27
目的：以自行构建的真核表达质粒pmU6为基 础，针对bcl-xL基因构建在细胞内表达短发夹状RNA（shRNA）的质粒载体，并观察它们 对CN E-2Z、MCF-7和ECV-304细胞株增殖的影响。方法：将两条合成的bcl-xL 寡核苷酸链插入pmU6载体中产生pmU6-RNAi重组质粒，把重组质粒转染到细胞中，MTT比色法 检测细胞的生长抑制率。结果：bcl-xL shRNA 对CNE-2Z细胞...
鼠反义转化生长因子betaⅠ型受体真核表达质粒的构建与鉴定
反义 质粒 转化生长因子β型受体 肝纤维化
2009/8/6
目的: 构建鼠反义转化生长因子betaⅠ型受体(TbetaRⅠ)基因pcDNA3.1(+)真核表达质粒, 为进一步研究通过TbetaRⅠ干预肝纤维化的发生发展提供实验基础.方法: 将取冰冻保存的大鼠肝组织, 应用TRIzol法提取总RNA, 琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性, 并用紫外分光核酸蛋白分析仪测定RNA浓度和纯度. 使用一步法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂盒获得目的基因TbetaR...
目的:构建含人CD40 ligand(CD40L)基因的真核表达载体,并使之在人肝癌细胞HepG2中表达,研究CD40L稳定表达对HepG2细胞的影响.方法:从人外周血单个核细胞总RNA中经RT-PCR扩增出人CD40L基因,经过酶切连接进入真核表达载体pcDNATM3.1/myc-His(-)A制备重组质粒.重组质粒经酶切及测序证实人CD40L基因成功克隆进入真核表达载体pcDNATM3.1/m...
赖型钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL41基因真核表达质粒的构建及表达
钩端螺旋体属 基因 LipL41 真核表达
2009/5/26
目的：构建赖型钩端螺旋体LipL41基因的真核重组表达质粒、并对其表达进行检测。方法： 以赖型钩端螺旋体017株基因组DNA为模板PCR扩增目的基因，克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1上。测序分析后酶切，并连接至真核表达质粒pcDNA3上，构建真核重组表达质粒LipL41-pCDNA3。利用脂质体介导转染COS7细胞，提取细胞总RNA，RT-PCR检测其表达。结果： PCR扩增出1 011 bp...
恶性疟原虫复合抗原重组真核表达质粒的构建与表达
恶性疟原虫 DNA疫苗 抗原 基因
2009/2/25
目的 构建编码恶性疟原虫不同发育期抗原表位的复合抗原基因HGFSP的重组真核表达质粒。 方法 将HGFSP亚克隆于真核表达载体pcDNA3构建重组真核表达质粒 pc HGFSP ;琼脂糖凝胶电泳和限制性内切酶分析鉴定 ;脂质体介导转染HepG2细胞。取经G418筛选的阳性细胞克隆进行免疫学鉴定。 结果 酶切及电泳鉴定证实pc HGFSP含有HGFSP。间接免疫荧光试验 (IFAT)、SDS PA...
恶性疟原虫富组氨酸蛋白2重组蛋白与真核表达质粒免疫特性的比较
恶性疟原虫 富组氨酸蛋白2 疫苗 免疫应答
2009/2/25
目的 探讨以恶性疟原虫富组氨酸蛋白 2 (PfHRP2 )为基础的不同形式的侯选疫苗诱导小鼠免疫应答的特性 ,为包含HRP2的恶性疟红内期疫苗的研制提供实验依据。方法 用重组蛋白TP HRP2及真核表达质粒pcDNA3 1(- ) HRP2免疫BALB c小鼠 ,对抗体应答的动力学及特异性进行分析 ,取脾细胞进行体外增殖实验 ,用免疫血清进行P f.体外生长抑制实验。结果 重组蛋白TP HRP2加...