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内蒙古科技大学数理与生物工程学院分子生物学实验课件实验一 质粒DNA的小量提取。
为评价分子佐剂细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)对IBDV VP2质粒DNA的免疫增强作用，试验采用重组质粒载体表达重组蛋白mLTA-VP2-CTLA-4和mLTA-CTLA-4，家兔毒性试验确定其安全性，后选择10日龄非免疫健康鸡进行随机分组试验，设不同剂量mLTA-CTLA-4加IBD活疫苗免疫组、不同剂量mLTA-VP2-CTLA-4免疫组、IBD活疫苗免疫组及空白对照组，免疫后用...
猪β_2肾上腺素受体基因克隆及重组酵母表达质粒的构建
β肾上腺素受体 克隆 酵母表达质粒 猪
2016/6/28
克隆猪β2AR基因并进行序列分析,构建其重组酵母表达质粒。采集新鲜猪肝组织,提取总RNA,经RT-PCR扩增、克隆及鉴定,获得猪β2AR的c DNA序列,并对该序列及编码的氨基酸序列进行分析。同时将目的基因插入p PICZαA酵母表达载体,构建重组表达质粒。克隆获得猪β2AR基因c DNA序列1257 bp,Genbank登录号为KF023571.1,编码418个氨基酸,蛋白分子质量46.73 k...
为分析携带blaCTX-M-65、rmtB和fosA3多重耐药质粒pHN7A8的适应性代价，将犬源大肠杆菌7A8的多重耐药质粒pHN7A8转化入大肠杆菌JM109中，获得转化子7A8JT，并采用生长曲线测定和竞争试验方法研究pHN7A8对宿主菌适应性的影响。结果表明，携带pHN7A8的转化子7A8JT和受体菌JM109的生长曲线相似，但前者对于后者有竞争优势，未发现质粒pHN7A8对宿主菌产生适应...
小G蛋白家族成员Rap2a可调控内皮素和细胞粘附从而影响细胞运动及细胞与基质间相互作用，但其在肿瘤发生发展中的作用仍属未知。克隆人Ras家族小G蛋白Rap2a的cDNA，构建其真核表达质粒并在肺癌细胞表达，初步探讨Rap2a在肺癌发生发展中的作用。方法 Western blot检测Rap2a在肺癌细胞中的内源性表达。人骨肉瘤细胞株U2OS提取细胞总RNA，经逆转录聚合酶链式反应逆转录成cDNA，P...
一株大质粒决定的耐镉假单胞菌的鉴定与耐受性分析
重金属污染 耐镉细菌 假单胞菌属 质粒消除
2016/6/29
分离到一株耐镉菌株XZC1,结合菌落特征和16S r DNA序列对其进行鉴定,将该菌在含Cd2+液体LB培养基中进行连续培养,获得菌体生长情况,分析该菌株镉耐性是否与质粒相关,检测菌株对其他几种重金属的耐性。结果表明,该菌株是Pseudomonas sp.,在Cd2+浓度为400mg/L LB培养基中可正常生长;经过质粒消除的XZC1不具有镉耐性,说明该菌株的镉耐性基因存在于大质粒上;XZC1对F...
构建STK11基因融合质粒检测其对肺癌细胞迁移能力的影响
STK11 细胞迁移 A549 H460
2014/7/16
构建表达STK11（serine/threonine kinase 11，STK11）基因和报告基因EGFP融合蛋 白的重组质粒，并转染肺癌A549和H460细胞株，检测其对肺癌细胞迁移能力的影响。方法 构建重 组质粒pEGFP-STK11，双酶切和测序进行鉴定。重组质粒转染A549和H460细胞株，荧光显微镜观察 EGFP蛋白表达情况，Western blot检测STK11蛋白表达情况，划痕实验...
检测真核质粒pMAGEA3-IRES-SEA经过电穿孔转染在小鼠中的转录。方法 将葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal endotoxin A，SEA)和喉癌来源的黑色素瘤抗原A3(melanoma- associated antigen A3，MAGE-A3)，构建成基因共表达的真核质粒pMAGEA3-IRES-SEA。将pMAGEA3-IRES-SEA用电转染的方法免疫BALB/C小...
本研究旨在克隆绵羊ApoER2基因，构建ApoER2-siRNA质粒载体，研究ApoER2基因沉默对睾丸共培养细胞Sel P和PHGPx表达的影响。利用RT-PCR技术，克隆ApoER2序列，在此基础上构建4种pGPU6/GFP/Neo-ApoER2-siRNA质粒表达载体，利用脂质体将其转染到体外共培养绵羊睾丸细胞中，采用Real-time PCR和Western blotting方法，检测其抑...
目的：通过构建携带针对miR-194 的慢病毒沉默及过表达载体，研究miR-194 对骨肉瘤细胞转移的影响。方法：以miR-194 前体及成熟体序列为模板，设计引物，进行PCR 扩增，酶切后克隆于慢病毒载体plent-iGFP 中，转染293T 细胞，包装慢病毒颗粒，检测滴度，最终对人骨肉瘤细胞系U2-OS 进行感染。获取稳定感染细胞后，进行Transwell 、划痕等实验。结果：1）慢病毒表达质...
中国科学院昆明植物所分离得到嗜盐古菌质粒新类型
中国科学院昆明植物所 嗜盐古菌质粒 新类型
2014/1/20
记者从中科院昆明植物研究所获悉，该所研究员杨祝良指导的博士生陈绍兴等日前从嗜盐古菌中分离到一种新型质粒，将其命名为pHRDV1。研究认为，该质粒代表了嗜盐古菌质粒的一种新类型。该研究成果近日在线发表于《极端微生物》。
中国科学院昆明植物所分离得到嗜盐古菌质粒新类型
中国科学院昆明植物所 嗜盐古菌质粒
2014/1/20
从中科院昆明植物研究所获悉，该所研究员杨祝良指导的博士生陈绍兴等日前从嗜盐古菌中分离到一种新型质粒，将其命名为pHRDV1。研究认为，该质粒代表了嗜盐古菌质粒的一种新类型。该研究成果近日在线发表于《极端微生物》。
中国科学院昆明植物研究所在嗜盐古菌质粒研究中取得新进展（图）
嗜盐古菌 微生物 基因组测序 质粒pHRDV1
2014/1/9
古菌是生活在极端自然环境（如高温、低温、强酸、强碱、高压、厌氧或高盐）的一类特殊微生物。嗜盐古菌是古菌域真古菌界中的一个重要类群，主要分布于各种高盐环境，在医药和化工等方面具有应用前景。嗜盐古菌质粒研究为更好地开发利用嗜盐古菌资源和揭示高盐环境基因水平转移奠定基础。
构建大鼠心脏kir2.2、kir2.3通道真核表达质粒，并鉴定其在人胚胎肾细胞（HEK293）中的表达。方法 提取大鼠心脏组织细胞RNA，逆转录扩增kir2.2、kir2.3通道编码基因，克隆至真核表达质粒pEGFP-N1中，构建重组质粒并转染HEK293细胞，应用全细胞膜片钳法定kir2.2、kir2.3通道电流。结果 重组质粒pEGFP-N1-kir2.2及pEGFP-N1-kir2.3 经双...